G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)DTX/MATE基因/LHRHa紫杉醇微泡偶聯(lián)表達(dá)LHRH受體A2780/DDP細(xì)胞
瑞禧小編今天分享了G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)DTX/MATE基因/LHRHa紫杉醇微泡偶聯(lián)表達(dá)LHRH受體A2780/DDP細(xì)胞的制備法,一起來學(xué)習(xí)!

LHRHa紫杉醇微泡偶聯(lián)表達(dá)LHRH受體A2780/DDP細(xì)胞制備:
探討生物素-鏈酶親和素橋接法制備攜LHRHa配體的靶向紫杉醇脂質(zhì)微泡的可行性,并觀察其體外尋靶能力. 方法:以親和素作為媒介,利用生物素-鏈酶親和素橋接法將生物素化的LHRHa配體結(jié)合到生物素化紫杉醇脂質(zhì)微泡上,制備成LHRHa靶向紫杉醇脂質(zhì)微泡即PLMT.以普通脂質(zhì)微泡作為對照,通過免疫熒光染色驗證LHRHa與生物素化紫杉醇脂質(zhì)微泡的結(jié)合情況,應(yīng)用流式細(xì)胞儀分析PLMT的配體結(jié)合率,光鏡觀察PLMT對A2780/DDP的體外尋靶能力.
G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)DTX/MATE基因的制備:
檢測MAPK家族成員(ERK1/2、JNK和p38)的活化水平;MTT assay檢測DHT快速作用對細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果:DHT可以在一定范圍內(nèi)濃度依賴性地誘導(dǎo)PC3細(xì)胞[Ca~(2+)]i快速升高,而且也能快速誘導(dǎo)ERK1/2、JNK的磷酸化,但是對p38的磷酸化卻表現(xiàn)為快速的抑制作用;當(dāng)細(xì)胞外無Ca~(2+)或使用L-型鈣離子通道阻斷劑預(yù)處理細(xì)胞,DHT不能誘導(dǎo)這種快速效應(yīng)。
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