分析氫譜是有機(jī)化學(xué)、高分子化學(xué)的必備技能，相信很多小伙伴做完核磁一臉懵逼，不知道怎么處理數(shù)據(jù)和分析譜圖。話不多說，跟著新維創(chuàng)生物一起來學(xué)習(xí)一下核磁的數(shù)據(jù)解析吧……（PS：分析核磁的數(shù)據(jù)我們常用的軟件是Topspin軟件和MestReNova軟件，網(wǎng)絡(luò)上有很多關(guān)于軟件安裝和操作的教程，我們這里重點(diǎn)分享的是數(shù)據(jù)分析的流程和相關(guān)經(jīng)驗(yàn)。）

核磁氫譜的測試結(jié)果是以一個(gè)文件夾的形式保存的，其中一個(gè)名稱為fid的、數(shù)百KB大小的文件便是即為測試結(jié)果原始數(shù)據(jù)，將其拖入MestReNova軟件工作區(qū)便可打開。如下圖，打開了一個(gè)PEG衍生物在氘代氯仿中的核磁圖。

首先拿到一個(gè)譜圖，我們第一步需要校正基線、相位和化學(xué)位移。

第一步，打開處理選項(xiàng)卡，進(jìn)行相位校正與基線校正

點(diǎn)擊相位校正—自動(dòng)：有時(shí)候核磁儀器測出的結(jié)果中會在一些峰的左右出現(xiàn)基線的明顯偏移，使用相位校正功能即可解決這個(gè)問題。

點(diǎn)擊基線—自全動(dòng)：同樣的，核磁氫譜的基線也會有“上下波動(dòng)”的情況，使用基線可以調(diào)平。

許多特別關(guān)注出峰積分的同學(xué)應(yīng)該已經(jīng)注意到了，基線與相位的平滑、正確與否對積分的計(jì)算具有明顯的明顯，因此需要結(jié)合這兩個(gè)軟件功能才能測得一個(gè)比較準(zhǔn)確的結(jié)果。注意，相位不正確時(shí)調(diào)節(jié)基線是無效的，因此務(wù)必先調(diào)節(jié)相位。

第二步，打開分析—參考—參考選項(xiàng)卡，進(jìn)行某一峰的化學(xué)位移定義。

核磁氫譜中的化學(xué)位移的值是一個(gè)相對的值，用于核磁測試的氘代試劑中加入了四甲基硅TMS作為內(nèi)標(biāo)，其上甲基的化學(xué)位移被定義為0，測試的分子上的氫原子的化學(xué)位移值根據(jù)與TMS上氫的區(qū)別而確定。許多化學(xué)反應(yīng)的前后變化僅會有某處氫峰發(fā)生位移，比如2-溴乙酸變?yōu)?-疊氮乙酸，需要根據(jù)出峰位置判斷反應(yīng)是否完全進(jìn)行，因此需要這一功能處理譜圖以防止儀器誤差造成的判斷錯(cuò)誤。此外，當(dāng)測試的分子中包含TBDMS等基團(tuán)時(shí)，測試軟件可能會將該類基團(tuán)上的Si-CH3峰的化學(xué)位移當(dāng)成為0，為了作圖的嚴(yán)謹(jǐn)，同樣需要對真正的TMS峰進(jìn)行矯正。當(dāng)然，這里所說的峰不僅僅單指TMS上的氫峰，也可以用于定義氘代氯仿（7.26），氘代DMSO（2.54）或者測試物質(zhì)上的某個(gè)氫峰。

具體方法是，打開分析—參考—參考選項(xiàng)卡，此時(shí)移動(dòng)光標(biāo)，軟件會自動(dòng)將光標(biāo)對準(zhǔn)到峰的最高點(diǎn)處并顯示此處的化學(xué)位移；點(diǎn)擊這個(gè)最高點(diǎn)，出現(xiàn)一個(gè)新的窗口，在新的化學(xué)位移一欄輸入你希望的值并點(diǎn)擊OK按鈕即可。