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細(xì)胞分離研究丨艾美捷 Worthington梭菌蛋白酶方案

2022-07-21 15:28 作者:艾美捷  | 我要投稿

梭菌蛋白酶(內(nèi)蛋白酶-Arg-C)背景:

梭菌蛋白酶是一種半胱氨酸激活的蛋白酶,與膠原酶和其他蛋白酶一起存在于溶組織梭菌的培養(yǎng)濾液中。它對精氨酸的羧基肽鍵的特異性及其對硫醇和鈣離子的依賴性是獨(dú)特的。

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艾美捷Worthington梭菌蛋白酶特異性

梭菌蛋白酶以較低的速率選擇性地水解精氨酰鍵和賴氨酰鍵。它還可以作為轉(zhuǎn)肽酶,在?pH 7.6-9.0?時具有最大活性(Anderson 1985,以及?Fortier?和?MacKenzie 1986)。

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艾美捷Worthington梭菌蛋白酶分子特征:

重鏈和輕鏈均由具有?1581?個核苷酸開放閱讀框?(ORF)?的單個基因編碼。基因表達(dá)后,整個?ORF(信號區(qū)、前區(qū)和?9?個氨基酸肽接頭)被轉(zhuǎn)錄。翻譯后加工產(chǎn)生異二聚體活性酶(Dargatz ?et al. ?1993)。 ?

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活化劑:

巰基要求:二硫蘇糖醇、半胱氨酸或其他還原劑

鈣離子是bi不可少的

還原劑

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抑制劑:

乙二胺四乙酸

氧化劑

巰基試劑(如?TLCK)(Porter et al. 1971)

Co 2+、Cu 2+、Cd 2+和重金屬離子

檸檬酸鹽、硼酸鹽和?Tris?陰離子部分抑制

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艾美捷Worthington梭菌蛋白酶的5個應(yīng)用

1.肽圖

2.序列分析

3.細(xì)胞分離?(Wang et al. 2004)

4.酰胺鍵的水解/縮合

5.肽合成?(Meiwes et al. 1991)

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相關(guān)文獻(xiàn):

1.Gilles, A.、Imhoff, J.?和?Keil, B.: 梭菌蛋白酶高活性形式的化學(xué)特性、活性和硫醇含量 ,?J Biol Chem 254 , 1462, 1979

2.Gilles, A.、Lecroisey, A.?和?Keil, B.:α-梭菌蛋白酶輕鏈的初級結(jié)構(gòu) ,?Eur J Biochem 145 , 469, 1984

3.Homandberg, G.、?Komoriya , A.?和?Chaiken, I.: 非結(jié)合肽片段的酶促縮合使用分子阱 , 生物化學(xué)?3385、3385、1982

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Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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