愈傷組織的培養(yǎng)及外植體的選擇，組培室的環(huán)境控制
愈傷組織的培養(yǎng)
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在植物組織培養(yǎng)過程，植物的細胞、組織、器官等均可作為外植體進行離體培養(yǎng)。依據(jù)外植體來源的不同，植物組織培養(yǎng)可分為愈傷組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、花藥和花粉培養(yǎng)、胚培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)。
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愈傷組織是指在形態(tài)上沒有分化但能進行活躍分裂的細胞團，細胞分裂疏松無序或較為緊密。在自然狀態(tài)下，當植物體的一部分受到機械損傷、昆蟲咬傷或風雪等自然災害的襲擊后，能夠在傷口處形成疑團愈傷組織，起到修復和保護作用。在離體培養(yǎng)條件下，許多植物的外植體也會出現(xiàn)類似情況，在外植體切口處及其附近形成愈傷組織；所不同的是離體培養(yǎng)條件下產(chǎn)生的愈傷組織細胞具有再分化的潛力，即細胞能夠分裂、增殖和分化出不同形態(tài)、執(zhí)行不同功能的組織和器官。
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愈傷組織培養(yǎng)是植物組織培養(yǎng)中一項很重要的技術，絕大多數(shù)植物在培養(yǎng)時都要先經(jīng)過愈傷組織階段，再進行形態(tài)發(fā)生過程。主要應用于研究植物生長發(fā)育及分化機制、遺傳變異規(guī)律；還可用于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)有用化合物，或作為原生質(zhì)體培養(yǎng)材料來源等。
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愈傷組織的誘導和分化
從培養(yǎng)的植物材料獲得愈傷組織，大致可分為誘導、分裂和分化3個階段。
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誘導期
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用于誘導愈傷組織的植物材料是由已經(jīng)分化的成熟植物細胞組成，如葉片是由表皮、葉肉和葉脈3部分組成，其構成的各種類型細胞均為已經(jīng)分化的成熟細胞，大部分已經(jīng)喪失了分生能力，不能進行細胞分裂。根據(jù)植物細胞全能性理論，已高度成熟和分化的植物細胞，也還保持著恢復到分生狀態(tài)的能力。
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植物愈傷組織培養(yǎng)是利用特定的條件，促進細胞脫分化，使原已分化并具有一定功能的細胞脫離原有發(fā)育方向，失去原有狀態(tài)和功能，而恢復到未分化的愈傷組織狀態(tài)，這就是脫分化過程。實現(xiàn)此過程可通過在培養(yǎng)基中添加植物生長調(diào)節(jié)劑，促使已分化的細胞改變原有代謝途徑，為重新啟動細胞分裂做準備。
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誘導階段的長短取決于該細胞原來的生理狀態(tài)、培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的種類、含量和相對比例以及培養(yǎng)條件的因素。如菊芋的誘導期只需1d，胡蘿卜的誘導期則需要幾天時間。一般培養(yǎng)材料細胞的分化程度愈高或愈成熟，進行脫分化誘導也就愈加困難，需要的時間也就越長。在誘導期，通過一些刺激因素和植物生長調(diào)節(jié)劑的誘導作用，使其合成代謝活化，細胞內(nèi)的合成代謝迅速進行，但是細胞的大小并沒有多大改變。
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外源植物生長調(diào)節(jié)劑對誘導細胞分裂效果最好，其在植物愈傷組織培養(yǎng)中得到廣泛的應用。因此，依據(jù)實際情況，可通過調(diào)整生長調(diào)節(jié)劑的種類和濃度來誘導細胞進行分裂。經(jīng)過誘導的植物細胞在內(nèi)部生理上將發(fā)生顯著的變化，如細胞質(zhì)增加、出現(xiàn)活躍的原生質(zhì)環(huán)流、儲藏物質(zhì)淀粉等消失，蛋白質(zhì)和核酸的含量增加，為啟動細胞分裂做準備。
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分裂期
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分裂期是指細胞通過分裂方式，不斷增生子細胞的過程。對一些植物來說，誘導細胞分裂和使細胞保持分裂能力可能需要相同的條件，即在同一條件下就可完成細胞脫分化全過程。但也有一些植物在完成短時間誘導后，需要改變培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件，否則只能見到少量愈傷組織或或完全沒有肉眼可見的變化。一般來說，誘導階段需要較高濃度的生長素和細胞分裂素，細胞分裂階段則要適當降低植物生長調(diào)節(jié)劑的濃度。植物細胞一經(jīng)誘導，其外層細胞完成脫分化過程，細胞開始迅速分裂。在細胞體積變小，內(nèi)無液泡，細胞核和核仁增至最大，RNA含量持續(xù)上升等。培養(yǎng)物的形態(tài)變化表現(xiàn)為外層細胞分裂迅速。
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分裂期愈傷組織的特征：細胞分裂快，結構疏松，缺少有組織的結構，顏色淺而透明。如果在原培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，細胞將不可避免地發(fā)生分化，產(chǎn)生新的結構，但把組織塊及時轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上，則愈傷組織可無限制地維持在不分化的增殖狀態(tài)。
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外植體的脫分化因植物種類和器官及其生理狀況而有很大差異，如煙草、胡蘿卜等脫分化較容易，而禾谷類植物的脫分化較困難；花器脫分化較易，而莖、葉較難；幼嫩組織脫分化較易，而成熟的老組織較難。
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分化期
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分化期是指停止分裂的細胞發(fā)生生理代謝變化，出現(xiàn)形態(tài)和功能各異細胞的時期，其主要形態(tài)變化如下：
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細胞分裂部位和方向發(fā)生變化。分裂期細胞主要進行平周分裂（局限于組織外緣并于組織周緣平行的分裂），而在分化期開始后，愈傷組織表層細胞的分裂逐漸減慢，并停止。轉(zhuǎn)變?yōu)橛鷤M織內(nèi)部深處的局部區(qū)域的細胞分裂，使分裂面的方向改變，出現(xiàn)了由分生組織構成的“瘤狀結構”。
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形成分生組織瘤狀結構和維管組織。迅速生長的愈傷組織是類似的，處于分化期的愈傷組織會形成由分生組織組成的瘤狀結構，它們往往變成不再進一步分化的生長中心，而從其周緣產(chǎn)生擴展的薄壁細胞，其結果使一個活躍生長的愈傷組織形成一種“泡狀”增殖的特征。在愈傷組織中，可形成維管組織，但通常并不形成維管系統(tǒng)，而是呈分散的節(jié)狀和短束狀結構，它可由木質(zhì)部組成，或由木質(zhì)部、韌皮部形成層組成。在所有生長調(diào)節(jié)劑中細胞分裂素對木質(zhì)部誘導作用比較明顯。
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細胞的形態(tài)大小保持相對穩(wěn)定，體積不再減小，愈傷組織不再增殖。
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出現(xiàn)了各種類型的細胞，如管胞、篩胞、薄壁細胞、石細胞、色素細胞等。
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愈傷組織的形態(tài)發(fā)生
在植物材料培養(yǎng)過程中，植物細胞經(jīng)過脫分化過程和持續(xù)的細胞分裂而形成愈傷組織。在愈傷組織中形成一些分生細胞團，隨后再分化出各種器官原基，甚至體細胞胚，進而發(fā)育成苗或完整植株。
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器官形成：愈傷組織培養(yǎng)中器官發(fā)生分為3個不同階段：
①細胞增殖或離體外植體脫分化形成愈傷組織。
②?愈傷組織中形成一些分生細胞和瘤狀結構。
③?在一定條件下，分生細胞逐漸轉(zhuǎn)變成為縱軸上表現(xiàn)出單向極性器官原基，即分化出芽和根。
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在植物組織培養(yǎng)中，當外植體形成愈傷組織后，可通過調(diào)整植物生長劑比例促使芽和根的分化。一般來說，生長素有利于愈傷組織形成根，細胞分裂素可促進愈傷組織形成芽。愈傷組織的器官發(fā)生順序有4種情況：
①?愈傷組織僅僅有芽或根器官的分別形成。
②?芽形成后，在其莖基部長出根而形成小植株。
③?先形成根，再從根的基部分化出芽形成小植株。
④?在愈傷組織的鄰近不同部位分別形成芽和根，然后兩者結合起來形成一株小植株。
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體細胞胚的發(fā)生
植物的體細胞在一定條件下誘導形成的類似合子胚的結構稱為體細胞，也稱胚狀體。在離體條件下，培養(yǎng)細胞經(jīng)脫分化后，發(fā)生持續(xù)細胞分裂增殖，并順次經(jīng)過原胚期、球形胚期、心形胚期、魚雷形胚期和子葉期，最終形成具有胚芽、胚根、胚軸的胚狀結構，進而長成完整植株。
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細胞經(jīng)由胚狀體方式形成完整植株，與不定芽和根的發(fā)生相比，有以下3個特征：
①?具有兩極性。
②?胚狀體與外植體維管組織之間無直接聯(lián)系。
③?胚狀體維管組織分布呈“Y”形。
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外植體的選擇與消毒
外植體的選擇
外植體是指植物組織培養(yǎng)中的各種接種材料。從理論上講，植物細胞都具有全能性，能夠再生新植株，任何器官、任何組織、單個細胞和原生質(zhì)體都可以作為外植體。但實際上，不同品種、不同器官之間的分化能力有巨大差異，培養(yǎng)的難易程度不同。為保證植物組織培養(yǎng)獲得成功，選擇合適的外植體是非常重要的。
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1、選擇優(yōu)良的種質(zhì)及母株
無論是離體培養(yǎng)繁殖種苗，還是進行生物技術研究，培養(yǎng)材料的選擇都要從主要的植物入手，選取性狀優(yōu)良的種質(zhì)、特殊的基因型和生長健壯的無病蟲害植株。尤其是進行離體快繁，只有選取優(yōu)良的種質(zhì)和基因型，離體快繁出來的種苗才有意義，才能轉(zhuǎn)化成商品；生長健壯無病蟲害的植株及器官或組織代謝旺盛，再生能力強，培養(yǎng)后容易成功。
2、選擇適當?shù)臅r期
組織培養(yǎng)選擇材料時，要注意植物的生長季節(jié)和生長發(fā)育階段，對大多數(shù)植物而言，應在其開始生長或生長旺季采樣，此時材料內(nèi)源激素含量高，容易分化，不僅成活率高，而且生長速度快，增殖率高。若在生長末期或已進入休眠期時采樣，則外植體可能對誘導反應遲鈍或無反應?；ㄋ幣囵B(yǎng)應在花粉發(fā)育到單核靠邊期取材，這時比較容易形成愈傷組織。百合在春夏季采集的鱗莖、片，在不加生長素的培養(yǎng)基中，可自由地生長、分化；而其他季節(jié)則不能。葉子花的腋芽培養(yǎng)，如果在1月至翌年2月間采集，則腋芽萌發(fā)非常遲緩；而在3-8月間采集，萌發(fā)的數(shù)目多，萌發(fā)速度快。
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3、選取適宜的大小
培養(yǎng)材料的大小根據(jù)植物種類、器官和目的來確定。通常情況下，快速繁殖時葉片、花瓣等面積為5mm2，其他培養(yǎng)材料的大小為0.5~1.0cm。如果是胚胎培養(yǎng)或脫毒培養(yǎng)的材料，則應更小。材料太大，不易徹底消毒，污染率高；材料太小，多形成愈傷組織，甚至難以成活。
4、外植體來源要豐富
為了建立一個高效而穩(wěn)定的植物組織離體培養(yǎng)體系，往往需要反復實驗，并要求實驗結果具有可重復性。因此，就需要外植體材料豐富并容易獲得。
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5、外植體要易于消毒
在選擇外植體時，應盡量選擇帶雜菌少的器官或組織，降低初代培養(yǎng)時的污染率。一般地上組織比地下組織消毒容易，一年生組織比多年生組織消毒容易，幼嫩組織比老齡和受傷組織消毒容易。
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外植體取材的部位
植物組織培養(yǎng)的材料幾乎包括了植物體的各個部位，如莖尖、莖段、花瓣、根、葉、子葉、鱗莖、胚珠和花藥等。
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1、莖尖
莖尖不僅生長速度快，繁殖率高，不容易發(fā)生變異，而且莖尖培養(yǎng)是獲得脫毒苗木的有效途徑。因此莖尖是植物組織培養(yǎng)中最常用的外植體。
2、節(jié)間部
大部分果樹和花卉等植物，新梢的節(jié)間部是組織培養(yǎng)的較好材料。新梢節(jié)間部位不僅消毒容易，而且脫分化和再分化能力較強，因此是常用組織培養(yǎng)材料。
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3、葉和葉柄
葉片和葉柄取材容易，新出的葉片雜菌較少，實驗操作方便，是植物組織培養(yǎng)中常用的材料。尤其是近年在植物的遺傳轉(zhuǎn)化中，以葉片為試驗材料的報道很多。
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4、鱗片
水仙、百合、蔥、蒜、風信子等鱗莖類植物常以鱗片為材料。
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5、其他
種子、根、塊莖、塊根、花粉等也可以作為植物組織培養(yǎng)的材料。
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不同種類的植物以及同種植物不同的器官對誘導條件的反應是不一致的。如百合科植物風信子、虎眼萬年青等比較容易形成再生小植株，而郁金香就比較困難。百合鱗莖的鱗片外層比內(nèi)層的再生能力強，下段比中、上段再生能力強。選取材料時要對所培養(yǎng)植物各部位的誘導及分化能力進行比較，從中篩選出合適的、最易表達全能性的部位作為為植體。
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外植體的消毒
植物組織培養(yǎng)用的外植體大部分取自田間，表面上附著大量的微生物，這是組織培養(yǎng)的一大障礙。因此在材料接種培養(yǎng)前必須要消毒處理，消毒一方面要求把材料表面上的各種微生物殺滅，同時又不能損傷或只輕微損傷組織材料而不影響其生長。因此，外植體的消毒處理是植物組織培養(yǎng)工作中的重要一環(huán)。
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常用的消毒劑
理想的消毒劑應具有消毒效果好，易被無菌水沖洗掉或能自行分解，對材料損傷小，對人體及其他生物無害，來源廣泛，價格低廉。
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常用消毒劑的使用方法及效果
①酒精
酒精是最常用的表面消毒劑，以70%~75%酒精殺菌效果最好，95%或無水酒精會使菌體表面蛋白質(zhì)快速脫水凝固，形成一層干燥膜，阻止了酒精的繼續(xù)滲入，殺菌效果大大降低。
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酒精具有較強的穿透力，使菌體蛋白質(zhì)變性，殺菌效果好。同時它還具有較強的濕潤作用，可排除材料上的空氣，利于其他消毒劑的滲入。但酒精對植物材料的殺傷作用也很大，浸泡時間過長，植物材料的生長將會受到影響，甚至被酒精殺死，使用時應嚴格控制時間。但酒精不能徹底消毒，一般不單獨使用，多與其他消毒劑配合使用。
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②升汞
?又稱氯化汞，Hg2+可以與帶負電荷的蛋白質(zhì)結合，使蛋白質(zhì)變性，從而殺死菌體。升汞的消毒效果極佳，但易在植物材料上殘留，消毒后需用無菌水反復多次沖洗。升汞對環(huán)境危害大，對人畜的毒性極強，使用后應做好回收工作。
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③次氯酸鈉
次氯酸鈉是一種較好的消毒劑，它可以釋放出活性氯離子，從而殺死菌體。其消毒能力很強，不易殘留，對環(huán)境無害。但次氯酸鈉溶液堿性很強，對植物材料也有一定的破壞作用。
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④漂白粉
漂白粉的有效成分是次氯酸鈣[Ca(ClO)2]，消毒效果很好，對環(huán)境無害。它易吸潮散失有效氯而失效，故要密封保藏。
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⑤過氧化氫
?也稱雙氧水，消毒效果好，易清除，又不會損傷外植體，常用于葉片的消毒。
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⑥新潔爾滅
是一種廣普表面活性消毒劑，對絕大多數(shù)植物外植體傷害很小，殺菌效果好。
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消毒方法
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莖尖、莖段及葉片等的消毒
消毒前先對植物組織進行修整，去掉不需要的部分，然后用自來水沖洗。對于一些表面不光滑或長有絨毛的材料，可用洗滌劑清洗，必要時用毛刷充分刷洗，硬質(zhì)材料可用刀刮。
消毒時在超凈臺上操作，先用70%酒精浸泡10~30s，以無菌水沖洗2~3次，然后按材料的老、嫩和枝條的堅實程度，分別采用2%次氯酸鈉浸泡10~15min或用0.1%升汞浸5~10min。消毒時要不斷攪動，使植物材料與消毒劑充分地接觸。若材料有絨毛，最好在消毒液中加入幾滴Tween-20，最后用無菌水沖洗3~5次。
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果實及種子的消毒
先用自來水沖洗10~20min，再用酒精迅速漂洗一下。果實用2%次氯酸鈉浸10min，后用無菌水沖洗2~3次。種子則先用10%次氯酸鈉浸泡20~30min，難以消毒的可用0.1%升汞消毒5~10min。對于種皮太硬的種子，也可預先去掉種皮，再用4%次氯酸鈉浸泡8~10min。
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花藥的消毒
用于組織培養(yǎng)的花藥多未成熟，其外面有花萼、花瓣或穎片保護，處于無菌狀態(tài)。消毒時將整個花蕾或幼穗用70%酒精浸泡數(shù)秒鐘，然后用無菌水沖洗2~3次，再在漂白粉中浸泡10min，最后用無菌水沖洗2~3次。
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根及底下部器官的消毒
由于這類材料生長于土壤中，表面帶菌量大，消毒較為困難?？上扔米詠硭疀_洗，軟毛刷刷洗，用刀切去損傷及污染嚴重部位，再用酒精漂洗后，置于0.1%升汞中浸5~10min或2%次氯酸鈉中浸10~15min，最后用無菌水沖洗3次。
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在操作時要根據(jù)材料的大小、幼嫩、質(zhì)地等差異做出判斷后，再選擇適宜的消毒劑種類、濃度和消毒時間，切不可生搬硬套。消毒的最佳效果應以最大限度地殺死材料上的微生物，而又對材料的損傷最小為好。
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草莓的莖尖脫毒
草莓“莖尖苗”是指離體莖尖形成的組培苗。莖尖培養(yǎng)可以脫掉病原，復壯種苗?！扒o尖苗”也能比常規(guī)繁殖的苗產(chǎn)生更多的匍匐莖，用于種苗擴繁。
“莖尖”通常包括生長點和1-2個葉原基，大約0.4-0.4毫米。一個標準的草莓莖尖如下圖所示。
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適合莖尖切割的匍匐莖狀態(tài)為：具有1-3片展開的葉片（下圖）。莖尖切割在體視顯微鏡下完成。
培養(yǎng)基：
莖尖培養(yǎng)“改良DKW+30g/L葡萄糖+BA0.1mg/L+IBA0.01mg/L+agar, 21-24℃”。
擴增培養(yǎng)基“BD1+40g/L葡萄糖+BA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+PVP0.1g/L+agar，25-30℃”。生根培養(yǎng)基“BX1+40g/L葡萄糖+IBA 1mg/L+PVP 0.1g/L++活性炭0.5g/L”。備注：草莓莖尖培養(yǎng)及組培苗擴增有多種培養(yǎng)基可供選擇，可根據(jù)實際情況調(diào)整。
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莖尖培養(yǎng)一般在試管中完成，歷時3-5個月。莖尖成苗過程如下圖。
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病毒檢測
利用酶聯(lián)免疫法檢測ARMV, RRSV, SLRV,TBRV 和SMYEV共5種病毒（法國標準）。病毒檢測也可以用PCR完成。
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質(zhì)量控制要點
（1）莖尖苗最多組培擴增10代。
（2）使用低濃度BA，不超過0.5mg/L。
（3）莖尖培養(yǎng)早期可以使用微生物培養(yǎng)基來篩查細菌和真菌污染。
草莓的概況
多年生草本，高10-40厘米。莖低于葉或近相等，密被開展黃色柔毛。葉三出，小葉具短柄，質(zhì)地較厚，倒卵形或菱形，稀幾圓形，長3-7厘米，寬2-6厘米，頂端圓鈍，基部闊楔形，側(cè)生小葉基部偏斜，邊緣具缺刻狀鋸齒，鋸齒極尖，上面深綠色，幾無毛，下面淡白綠色，疏生毛，沿脈較密；葉柄長2-10厘米，密被開展黃色柔毛。
草莓的地理分布
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原產(chǎn)南美，中國各地及歐洲等地廣為栽培。?
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草莓的營養(yǎng)價值
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草莓營養(yǎng)價值豐富，被譽為是“水果皇后”，含有豐富的維生素C、維生素A、維生素E、維生素PP、維生素B1、維生素B2、胡蘿卜素、鞣酸、天冬氨酸、銅、草莓胺、果膠、纖維素、葉酸、鐵、鈣、鞣花酸與花青素等營養(yǎng)物質(zhì)。
尤其是所含的維生素C，其含量比蘋果、葡萄都高7-10倍。而所含的蘋果酸、檸檬酸、維生素B1、維生素B2，以及胡蘿卜素、鈣、磷、鐵的含量也比蘋果、梨、葡萄高3到4倍。?
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草莓中富含豐富的胡蘿卜素與維生素A，可緩解夜盲癥，具有維護上皮組織健康、明目養(yǎng)肝，促進生長發(fā)育之效。草莓也富含豐富的膳食纖維，可促進胃腸道的蠕動，促進胃腸道內(nèi)的食物消化，改善便秘，預防痤瘡、腸癌的發(fā)生。
草莓傳統(tǒng)繁殖方法
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種子
種子繁殖多用于遠距離引種或培養(yǎng)草莓的實生苗來選育新品種，也可用于庭院綠化鮮食兼用型種植。于5-6月果實采收時，選取發(fā)育良好、充分成熟的果實供采種用。削下果皮，放入水中，洗去漿液，撈出晾干；或把削下的果皮直接晾干，然后揉碎，果皮與種子即可分離。
播種育苗多在翌春進行，但也可在采集種子的當年7-8月進行。播種前先備好廣口泥瓦盆，填人細碎營養(yǎng)土，壓平，種子提前8-12小時浸泡，待膨脹后撒播在土壤表面，再用篩子均勻篩上厚度為0.2厘米左右的細沙土覆蓋。為使土壤既含有足夠的水分，又能保持疏松，以利于種子生根發(fā)芽，可把播種后的泥瓦盆置于淺水池內(nèi)，待水慢慢滲濕盆里的土壤后取出，再覆蓋塑料薄膜，10天左右即可出苗。
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出苗后適當間苗，待幼苗長出3-4片真葉時，帶土移栽在小花盆里。適應一段時間后，再帶土移栽到繁殖苗圃。?
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分株
分株繁殖分為兩種，一是根狀莖分株，另一種是新莖分株。
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根狀莖分株
在果實采收后，及時加強對母株的管理，適時進行施肥、澆水、除草、松土等，促使新莖腋芽發(fā)出新莖分枝。當母株的地上部有一定新葉抽出，地下根系有新根生長時，挖出老根，剪掉下部黑色的不定根和衰老的根狀莖，將新的根狀莖逐個分離，這些根狀莖上具有5-8片健壯葉片，下部應有4-5條米黃色生長旺盛的不定根。分離出的根狀莖可直接栽植到生產(chǎn)園中，定植后要及時澆水，加強草莓種植管理，促進生長，第二年就能正常結果。
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新莖分株
除了根狀莖分株方法外，也可培育母株新莖苗結果。方法是：把第一年結果的植株，在果實采收后，帶土坨挖出，重新栽植在平整好的畦內(nèi)。畦寬70厘米，可栽2行，行距30厘米，行內(nèi)每隔50厘米挖一穴，每穴栽兩株苗。經(jīng)一個月后，母株上發(fā)出匍匐莖，當每株有2-3條匍匐莖時，掐去莖尖，促使母株上的新莖苗加粗。去匍匐莖要反復進行。這樣栽植的2年生苗，每穴至少可分生4-6個新莖苗。新莖上著生的花序，加上新莖苗周圍匍匐莖上的花序，比單純栽匍匐莖的花序要多1/3以上，產(chǎn)量也有顯著提高，而且還節(jié)省秧苗土地和勞力。果實采收后，把3年生草莓苗去掉，結一年果的2年生苗還可以利用。?
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草莓的組織培養(yǎng)
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為什么草莓要脫毒
草莓常通過無性繁殖為生產(chǎn)提供種苗。傳統(tǒng)匍匐莖分株繁殖，繁殖速度慢，親本的優(yōu)良性狀無法保持，草莓品質(zhì)下降。而長期使用無性繁殖種苗易使品種退化，病毒積累嚴重，抗病力減弱，草莓植株矮化，根系枯萎，果實少并且畸形果多，產(chǎn)量、質(zhì)量，效益銳減，成為生產(chǎn)上迫切需要解決的問題。
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草莓脫毒的優(yōu)勢
草莓脫毒就是利用組織培養(yǎng)技術對草莓苗的外植體（一般會用莖尖或花粉）進行脫毒處理，再進行組培快繁擴大數(shù)量，組織培養(yǎng)是草莓脫除病毒的一種最經(jīng)濟有效的途徑。
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通過植物組織培養(yǎng)技術進行草莓的脫毒與試管苗繁殖，縮短了草莓繁殖周期，脫毒苗的繁殖系數(shù)最高可以達到70到120棵，正常情況下普通苗的繁殖系數(shù)大約是在30到40棵。它的繁殖系數(shù)要比普通苗高出1.2到1.5倍。
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去除體內(nèi)積累的病毒含量，保持親本的優(yōu)良性狀，植株抗病、耐高溫或抗寒能力大大增強，一般很少施用農(nóng)藥。
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組織培養(yǎng)繁殖法獲得的組培苗比常規(guī)育苗生長旺盛，成活率高，產(chǎn)量高，經(jīng)濟效益好，能夠增產(chǎn)30%~50%，去病毒苗比原品種未脫毒苗每畝可增產(chǎn)900 ~ 1500公斤，平均產(chǎn)量可達3200公斤。
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果實色澤鮮艷，果個較大，果形均勻一致，外觀好，最大單果重60 ~80 克。?每株開花數(shù)多，花序數(shù)、座果率平均增加50%左右，結果期長，邊成熟邊開花。結果期一般延長20 ~ 25天。
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組培育苗法繁殖快，一年內(nèi)，一個分生組織可以獲得幾萬甚至幾十萬株幼苗，且不占用地，不受環(huán)境的影響，適宜工廠化生產(chǎn)。
草莓脫毒苗的繁育體系
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草莓三級種苗繁育體系是指草莓原原種苗、原種苗和生產(chǎn)用種苗三級種苗繁育體系。為了確保脫毒種苗性狀的穩(wěn)定，逐漸形成了四級草莓。
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原原種苗的獲得
先把切取的草莓芽進行熱處理，然后在無菌狀態(tài)下，切取分生組織尖端0.2毫米的生長點，在適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)出試管苗，獲得的試管苗要多次反復通過病毒鑒定，確認無病毒攜帶才能加速繁殖出大量試管苗，再進一步繁殖出原種苗，供生產(chǎn)使用。
原種苗的生產(chǎn)
由于實驗室生長的脫毒組培苗數(shù)量有限，成本很高，須進一步擴大繁殖，生產(chǎn)原種苗。
為了防止重新感染病毒，在擴大繁殖中必須采取嚴格的隔離措施。不能重茬或選擇前茬為茄科作物地，用棉隆或氯化鈷對苗地進行消毒。三、四月份定植，到九月就可以生產(chǎn)出原種苗。同時，在種植過程中觀察草莓的生長結果狀況，并檢測是否符合脫毒苗的條件。
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種苗
為了確保草莓苗形狀的穩(wěn)定性，獲得的原種苗，要進行第二次種植實驗，生長期及時防治病蟲害，重視水肥管理，減少草莓重新感染病毒的機會，觀察草莓生長狀況及各種性狀是否穩(wěn)定，獲得高質(zhì)量的草莓種苗，供草莓育苗農(nóng)戶繁育生產(chǎn)用苗。
生產(chǎn)苗
生產(chǎn)苗的繁育要選擇富含有機質(zhì)的土壤定植，管理到位，經(jīng)過一年的培育后，經(jīng)檢測達到相關規(guī)定質(zhì)量要求的植株為生產(chǎn)用苗。
草莓的主要品種
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草莓中國國內(nèi)優(yōu)良品種草莓栽培的品種很多，全世界共有20000多個，但大面積栽培的優(yōu)良品種只有幾十個。中國自己培育的和從國外引進的新品種有200-300個。生產(chǎn)上主要的栽培品種如下：
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碩豐
適宜長江中下游露地栽培。?
明晶
適宜在東北和華北露地栽培。?
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明旭
適于遼寧省等北方地區(qū)露地栽培，栽培時宜適當密植，每畝栽培1.2萬株左右。??
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春旭
適宜設施促成栽培。?
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星都號
星都1號草莓果肉深紅色，適合鮮食及加工速凍制汁、制醬。為早熟、大果、優(yōu)質(zhì)果實硬度大，耐貯運品系，適于半促成栽培。
星都2號草莓為早熟、大果、豐產(chǎn)、果實硬度高、耐貯運的新品系。?
石莓1號
豐產(chǎn)性能好，平均產(chǎn)量為334.6g，畸形果少，抗逆性和耐貯運性均好，抗病性較強，休眠期短，為優(yōu)良早熟品種。鮮食和加工均適宜，既可露地栽培，也適宜設施拱棚栽培。
草莓的生長習性
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草莓喜溫涼氣候，草莓根系生長溫度5-30℃，適溫15-22℃，莖葉生長適溫為20-30℃，芽在-15-10℃發(fā)生凍害，花芽分化期溫度須保持5-15℃，開花結果期4-40℃。草莓越夏時，氣溫高于30℃并且日照強時，需采取遮蔭措施。
草莓為喜光植物，但又有較強的耐蔭性。光強時植株矮壯、果小、色深、品質(zhì)好。中等光照、果大、色淡、含糖低，采收期較長；光照過弱不利草莓生長。
草莓根系分布淺、蒸騰量大，對水分要求嚴格，但不同生長期。草莓對水分的要求又稍有不同。早春和開花期，草莓需要水分值小低于土壤最大持水量的70%．果實生長和成熟期需求最多，達80%以上，采收之后，抽出匍匐莖和發(fā)新不定根，也需土壤含水量不低于70%，秋季是植株積累營養(yǎng)和花芽形成期，土壤水分也不得低于60%，草莓不耐澇，要求土壤有良好通透性，注意田間雨季排水。
草莓宜生長于肥沃、疏松中性或微酸性壤土中，過于粘重土壤不宜栽培，沙土多施廄肥，勤灌水，也可種草莓。?
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草莓的栽培技術
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選地
草莓地應選擇地勢稍高，地面平整，排灌方便，光照良好，有機質(zhì)豐富，保水力強，通氣性良好，PH值呈弱酸性或中性的肥沃土地。前茬作物以蔬菜、豆類、瓜類、小麥等較好。
草莓栽植前應徹底清除雜草，并施入腐熟農(nóng)家肥，一般每畝施有機肥5000千克，過磷酸鈣50千克，氯化鉀50千克做基肥，撒施均勻后耕翻30-40厘米，促進土壤熟化，土地平整后按100厘米做畦，畦面寬80厘米，畦溝寬20厘米，畦高15厘米，畦長20米。?
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定植
草莓在定植時應注意定向移栽，將苗的弓背向溝道一側(cè)，使花序著生在同一方向，栽植數(shù)量為一穴一株，栽植深度以上不埋心，下不露根為宜。
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合理密植：草莓的種植密度與種植水平關系很大，弱苗、遲栽、缺肥的田塊宜密，定植密度以每畝8000株左右為好，反之壯苗、早栽、足肥及采取地膜覆蓋技術宜稀栽，以每畝6000株為好，株行距50厘米×20厘米為宜。?
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澆水
栽后要澆一次透水，栽后一周內(nèi)一般早、晚各澆一次水，以后要使土壤經(jīng)常保持濕潤狀態(tài)，以利成活。?
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施肥
草莓從定植到開花結果需要較多的肥，除要施足基肥外，還要適時補充肥料，可在果實膨大期和采收始期畝施草莓專用肥或磷酸二氨10公斤。結合澆水以200倍液肥形式溝施效果較好，長勢好的田塊僅噴施0.1-0.2%磷酸二氫鉀2-3次，也有一定的增產(chǎn)效果，成花期原則上不噴。采果田施肥原則是適N重P、K，必須保持合理的配比關系，才能獲得較高產(chǎn)量和最大效益。?
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覆蓋
地膜覆蓋有顯著的早熟、增產(chǎn)效果，還能提高果實質(zhì)量，增加商品果率。一般在3月中下旬開始蓋膜。注意蓋膜前一定要摘除植株上的枯葉、老葉。?
田間管理
1、經(jīng)常摘除病葉、枯黃葉及病果，帶出草莓田外深埋，減輕病蟲害。
2、經(jīng)常摘除新出生的莖。
3、結合采收，發(fā)現(xiàn)有半面紅（向陽面）半面青的果實，可將其翻轉(zhuǎn)，促其均勻成熟。
4、經(jīng)常清溝理墑，不使雨后積水，降低田間濕度，減輕病果、爛果。?
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草莓的病蟲防治
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葉斑病
癥狀：葉斑病又稱蛇眼病，主要為害葉片、葉柄、果梗、嫩莖和種子。在葉片上形成暗紫色小斑點，擴大后形成近圓形或橢圓形病斑，邊緣紫紅褐色，中央灰白色，略有細輪，使整個病斑呈蛇眼狀，病斑上不形成小黑粒。
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防治：及時摘除病葉、老葉。發(fā)病初期用70%百菌清可濕性粉劑500倍-700倍液，十天后再噴一遍。或用70%代森錳鋅可濕性粉劑，每畝200克對水75千克進行噴霧。?
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白粉病
白粉病主要為害葉片，也侵害花、果、果梗和葉柄。葉片上卷呈湯匙狀?；ɡ?、花瓣受害呈紫紅色，不能開花或開完全花，果實不膨大，呈瘦長形；幼果失去光澤、硬化。近熟期草莓受到危害會失去商品價值。
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防治：在發(fā)病中心株及其周圍，重點噴布波美0.3度石硫合劑。采收后全園割葉，噴布70%甲基托布津1000倍液或50%退菌特800倍液及30%特富靈5000倍液等。?
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灰霉病
灰霉病是開花后的主要病害，在花朵、花瓣、果實、葉上均可發(fā)病。在膨大時期的果實上，生成褐色斑點，并逐漸擴大，灰霉使果實軟化、腐敗，嚴重影響產(chǎn)量。
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防治：于現(xiàn)蕾到開花期進行，用25%多菌靈可濕性粉劑300倍液、50%克菌丹可濕性粉劑800倍液、50%撲海因500倍～700倍液等噴霧。
根腐?。?/strong>
從下部葉開始，葉緣變成紅褐色，逐漸向上凋萎，以至枯死。支柱在中間開始變成黑褐色而腐敗，根的中心柱呈紅色?！?/p>
防治：草莓移栽前用40%蘆筍青粉劑600倍液，澆于畦面，然后覆土，整平移栽，以有效殺死土壤中的病菌，降低田間菌源基數(shù)，減少傳染機會。?
黃萎病
黃萎病是土壤病害，主要癥狀是幼葉畸形，葉變黃、葉表面粗糙無比。隨后葉緣變褐色向內(nèi)凋萎，直到枯死。
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防治：嚴格引入無病植株種植；縮短更新年限；用氯化苦13.5升-20升或太陽能覆蓋薄膜灌水進行土壤消毒；已發(fā)病者必須拔除燒毀。?
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蟲害
蚜蟲、白粉虱、螨類是草莓常見蟲害，露地和保護地均有。越是優(yōu)良品種，果實好吃，越易感蚜蟲，葉色黃或黃綠色也招蚜蟲。?
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防治：減少越冬蟲卵數(shù)量，秋末徹底清園，消滅雜草，及時摘除病老殘葉。
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設置黃板，板上涂機油誘殺蚜、白粉虱，或在放風口處設防蟲網(wǎng)阻隔，或掛銀灰色地膜條驅(qū)避蚜蟲。釋放麗蚜小蜂有效控制白粉虱?？捎醚`、敵敵畏等熏蒸劑熏蒸。
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用藥噴治：蚜蟲可用50%的辟蚜霧或50%抗蚜威可濕性粉劑2000倍液噴1-2次即可， 1.8%賽劍乳油1000倍液噴灑防治，10%的吡蟲啉可濕性粉劑1500-2000倍液，50%的馬拉松乳油1500倍液；白粉虱可用25%撲虱靈可濕性粉劑2500倍液，2.5%氯氟氰菊酯乳油3000-4000倍液；螨類可用低殘毒的觸殺作用強的增效殺滅菊酯5000-8000倍液噴2次，間隔5 天，20%雙甲脒乳油1000-1500倍液或甲胺基阿維菌素苯甲酸鹽乳油2000-3000倍液噴霧防治，10天左右一次。一般采果前兩周停止用藥。?
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線蟲
線蟲是肉眼不易看到，需借助顯微鏡。該蟲對草莓的一生都有危害，開花前后危害癥狀最明顯。傳播一是靠秧苗，二是靠土壤。草莓線蟲分為芽線蟲和根線蟲，草莓線蟲還是病毒傳播的媒介。?
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防治：清除病株，線蟲的傳播主要靠被害母株及匍匐莖，一起拔除，消滅病原。
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土壤消毒，栽前深翻土壤，用氯化苦進行土壤熏蒸消毒，溫室可采用土壤熏蒸和密閉棚室進行高溫悶蒸消毒。
熱處理消毒，栽苗前把秧苗浸入35℃熱水中浸泡10分鐘，然后冷卻再種植。⑷輪作，避免重茬，減輕線蟲的危害。?
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