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每日科研進(jìn)展 l 2022.06.05 l 敲除美國白蛾dsRNase可提高dsRNA 注射的 RNAi 效率

2023-07-26 10:42 作者:RNA生物農(nóng)藥  | 我要投稿


敲除美國白蛾dsRNase可提高dsRNA 注射的 RNAi 效率

??RNA?干擾?(RNAi)?技術(shù)是一種很有前途的害蟲防治方法。?RNAi?的效率在不同昆蟲物種之間差異很大,越來越多的證據(jù)表明,雙鏈?RNA (dsRNA)?的降解是限制昆蟲?RNAi?效率的一個(gè)重要因素。我們最近對中國重要的入侵害蟲美國白蛾的研究表明,通過?dsRNA?注射(被認(rèn)為是最可行的?dsRNA?遞送方法)對美國白蛾的?RNAi沉默效率相對較低,且參與機(jī)制的因素仍然未知。在這里,我們首先在離體測定中檢測到?dsRNA?在血淋巴和腸液中的降解活性,并觀察到dsRNA?的快速降解,特別是在血淋巴中,僅在?10?分鐘內(nèi)完成(圖?1)。


圖1. dsRNA 在血淋巴和腸液中迅速降解

為了確定?dsRNA?降解是否會(huì)導(dǎo)致?RNAi?在美國白蛾中的低有效性,通過針對美國白蛾轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫的同源性搜索鑒定了四個(gè)?dsRNA?核酸酶?(dsRNase)?基因?HcdsRNase1、HcdsRNase2、HcdsRNase3?和?HcdsRNase4,及其隨后在不同組織、發(fā)育階段和?dsRNA?注射后研究了轉(zhuǎn)錄水平。我們的研究結(jié)果表明,HcdsRNases?主要在腸道組織和血淋巴中高表達(dá),并且?HcdsRNase3?和?HcdsRNase4?的表達(dá)在?dsGFP?誘導(dǎo)下顯著上調(diào)。使用?HcCht5?作為報(bào)告基因的?RNAi-of-RNAi?研究表明,通過?dsHcCht5?注射沉默HcdsRNase3?和?HcdsRNase4?可顯著提高?RNAi?功效,并且共同沉默這兩個(gè)?HcdsRNase?基因可顯著提高功效(圖?2)。


圖 2. 敲除dsRNases可以提升RNAi效率

這些結(jié)果證實(shí),通過dsRNA注射對美國白蛾的RNAi功效肯定會(huì)受到dsRNase活性的影響,并且阻斷HcdsRNases可能會(huì)改善RNAi作用效率,為RNAi效率低的昆蟲的相關(guān)研究提供參考。


原文鏈接:

https://doi.org/10.3390/ijms23116182

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