一、影響RNA轉染率的原因

1.轉染試劑不適合。建議選擇RNA專用轉染試劑

2. 轉染試劑和RNA的量不夠，或者比例不對。優(yōu)化實驗條件，調(diào)整試劑和RNA用量，優(yōu)化二者比例。
3.檢測時間有問題。適當調(diào)整檢測時間。
4. RNA質量問題。選擇純度高的RNA。
5. 細胞狀態(tài)不佳。調(diào)整細胞狀態(tài)，調(diào)整細胞融合度。

二、如何提高RNA轉染率

1.純化RNA

在轉染前要確認RNA的大小和純度。為得到高純度的RNA，推薦用玻璃纖維結合，洗脫或通過15-20%丙烯酰胺膠除去反應中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和鹽離子。注意：化學合成的RNA通常需要跑膠電泳純化（即PAGE膠純化）。

2.避免RNA酶污染

微量的RNA酶將導致RNA實驗失敗。由于實驗環(huán)境中RNA酶普遍存在，如皮膚，頭發(fā)，所有徒手接觸過的物品或暴露在空氣中的物品等，此保證實驗每個步驟不受RNA酶污染非常重要。

3.健康的細胞培養(yǎng)物和嚴格的操作確保轉染的重復性

通常，健康的細胞轉染效率較高。此外，較低的傳代數(shù)能確保每次實驗所用細胞的穩(wěn)定性。為了優(yōu)化實驗，推薦用50代以下的轉染細胞，否則細胞轉染效率會隨時間明顯下降。