限制性消化也稱為限制性核酸內(nèi)切酶，是在特定位點(diǎn)切割 DNA 的過程，由周圍的 DNA 序列決定。限制性消化是通過將靶 DNA 分子與限制性內(nèi)切酶（識別和結(jié)合特定 DNA 序列并在識別序列內(nèi)或識別序列外切割特定核苷酸的酶）溫育來完成的。限制性消化可導(dǎo)致產(chǎn)生平末端（以堿基對結(jié)尾的 DNA 分子末端）或粘性末端（以核苷酸突出端結(jié)尾的 DNA 分子末端）。限制性消化通常用于制備用于子序列分子克隆的 DNA 片段，因?yàn)樵撨^程允許 DNA 片段像構(gòu)建塊一樣通過連接拼湊在一起。限制性消化的結(jié)果可以通過凝膠電泳進(jìn)行評估，其中消化產(chǎn)物在施加電場的聚合物凝膠中按分子長度（基于 DNA 分子的負(fù)電荷）分開。典型的限制性消化反應(yīng)的成分包括 DNA 模板、選擇的限制性內(nèi)切酶、緩沖液，有時(shí)還包括 BSA 蛋白。反應(yīng)在限制酶最佳活性所需的特定溫度下孵育并通過加熱終止。