細(xì)胞衰老（Cell senescence）是細(xì)胞控制其生長潛能的保障機(jī)制，一般含義是復(fù)制衰老（Replicative senescence，RS），指正常細(xì)胞經(jīng)過有限次數(shù)的分裂后，停止分裂，此時(shí)細(xì)胞雖然是存活的，但是細(xì)胞形態(tài)和生理代謝活性發(fā)生明顯變化的現(xiàn)象。體外衰老細(xì)胞研究常用的生物學(xué)特征包括：1）不可逆的生長停滯；2）與衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶（senescence associated β-galactosidase, SA-β-gal）的活化。作為溶酶體內(nèi)的水解酶，通常在pH 4.0的條件下表現(xiàn)活性，但是衰老細(xì)胞內(nèi)其在pH 6.0的條件下表現(xiàn)活性，且隨著傳代次數(shù)的增加，細(xì)胞群體中表現(xiàn)衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶的細(xì)胞數(shù)目逐漸增加。

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艾美捷細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒提供了一種易于使用和有效的方法來確定細(xì)胞

衰老。SA-β-半乳糖苷酶催化X-gal的水解，產(chǎn)生藍(lán)色。每個(gè)試劑盒提供足夠的量在35毫米培養(yǎng)皿中進(jìn)行多達(dá)50次檢測。

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艾美捷細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒套件組件：

1. 100X Fixing Solution ( 40010): One tube – 1.5 mL of 25% Glutaraldehyde

2. Staining Solution A ( 40011): One tube – 1.5 mL of 500 mM Potassium Ferrocyanide

3. Staining Solution B ( 40012): One tube – 1.5 mL of 500 mM Potassium Ferricyanide

4. Staining Solution C ( 40015): One bottle – 4.5 mL of 1 M Citrate-Na2HPO4 Buffer, pH

6.0, 50 mM MgCl2

5. Staining Solution D ( 40016): One bottle – 4.0 mL of 5 M NaCl

6. X-gal Solution ( 40014): Two tubes – 1.5 mL of 40 mg/mL X-gal in DMF in each tube

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艾美捷細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒相關(guān)研究：

1. CBA-080: CytoSelect? 24-Well Anoikis Assay

2. CBA-081: CytoSelect? 96-Well Anoikis Assay

3. CBA-231: 96-Well Cellular Senescence Assay Kit (SA-b-gal Activity, Fluorometric Format)

4. CBA-232: Quantitative Cellular Senescence Assay (SA β-Gal)

5. CBA-240: CytoSelect? Cell Viability and Cytotoxicity Assay

6. AKR-100: b Galactosidase Staining Kit

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試劑的制備：

?1X固定溶液：通過將提供的100X原液稀釋成1:100的1X溶液，制備1X固定溶液

PBS。將稀釋的溶液在室溫下儲(chǔ)存六個(gè)月。

?細(xì)胞染色工作溶液：根據(jù)

樣本數(shù)量。以下圖表適用于35mm板中的樣品

相應(yīng)地修改以適合其他培養(yǎng)板尺寸。