CalBioreagents ID蛋白抗體的功能和應(yīng)用實(shí)例
簡介:
Id蛋白家族有四個(gè)成員,Id1,Id2,Id3和Id4。這些蛋白質(zhì)最初被發(fā)現(xiàn)為參與細(xì)胞分化陰性對照的蛋白質(zhì)。Id蛋白通過與稱為bHLH(堿性螺旋-環(huán)-螺旋)蛋白的一組轉(zhuǎn)錄因子的物理相互作用而充當(dāng)轉(zhuǎn)錄的負(fù)調(diào)節(jié)劑。Id蛋白以防止DNA與HLH蛋白結(jié)合的方式與bHLH蛋白相互作用。由于這種活性,該組蛋白質(zhì)被命名為Id(用于DNA結(jié)合抑制劑)。還發(fā)現(xiàn)Id蛋白與許多其他蛋白結(jié)合,例如Rb,Ets,Paz,MIDA-1和SREBP-1c。
?
Id蛋白可能在協(xié)調(diào)基因表達(dá),細(xì)胞增殖,腫瘤發(fā)生和血管生成中起重要作用。已發(fā)現(xiàn)Id蛋白在許多類型中過表達(dá),包括膠質(zhì)母細(xì)胞瘤,髓母細(xì)胞瘤,神經(jīng)母細(xì)胞瘤,胰腺癌,甲狀腺癌,鱗狀細(xì)胞癌,乳腺癌,子宮內(nèi)膜癌,宮頸癌,黑素瘤和視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤。越來越多的證據(jù)表明Id1和Id3在血管生成中起著核心作用。在Id1-/-,Id3-/-敲除小鼠中的實(shí)驗(yàn)表明,隨著Id表達(dá)的喪失,沒有血管形成并且沒有隨后的腫瘤生長。(1,2,3,4,5)
1.Benezra?et?al.,?BioChemica?et?Biophysica?Acta?1551: (2001) F39-F47.
2.Benezra?et?al?.,?Oncogene?20:(2001)?8334-8341.
3.Lasorella?et al., Oncogene 20: (2001) 8326-8333.?
4.Zebedee?et al., Oncogene 20: (2001) 8317-8325.?
5.Perk?et al.?Cancer?Res.?66:?(2006)?10870-10877.
?
艾美捷CalBioreagents?ID蛋白抗體的化學(xué)性質(zhì):
抗原來源:重組全長小鼠Id1重組蛋白。
規(guī)格:50微克(目錄號M082),100微克(目錄號M083)或1毫克(目錄號M084)抗體濃度(A280nm):0.05mg/ml
形式:在含有0.25%BSA和0.05%疊丨氮化鈉的細(xì)胞培養(yǎng)上清液中瞬時(shí)表達(dá)抗小鼠Id1。
特異性:與小鼠Id1反應(yīng),不與人Id1反應(yīng)。尚未嘗試其他物種。
儲存條件:在2-8°C。不要凍結(jié)。冷凍時(shí)可能發(fā)生沉淀。
蛋白質(zhì)印跡:建議在合適的稀釋劑中將克隆37-2稀釋至0.1μg/ml(1/500),并在室溫孵育1-16小時(shí),用于Western印跡中的一抗步驟。蛋白質(zhì)印跡的最佳稀釋度應(yīng)由個(gè)體研究人員確定。

?
圖1:用克隆37-2進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡。泳道1來自ID1-/-小鼠胚胎成纖維細(xì)胞的全細(xì)胞提取物。泳道2來自Id1+/+小鼠胚胎成纖維細(xì)胞的全細(xì)胞提取物。泳道3來自HeLa細(xì)胞的全細(xì)胞提取物。對于克隆37-2,抗體的初次孵育濃度為0.1 ug/ml。(Perk等人。)
免疫組化:37-2適用于福爾馬林固定,石蠟包埋的組織。我們建議將克隆37-2稀釋至0.5μg/ml。(1/100)在合適的稀釋劑中,并在室溫下孵育2小時(shí)以進(jìn)行一抗步驟。用于免疫組織化學(xué)應(yīng)用的最佳稀釋度應(yīng)由個(gè)體研究人員確定。
?
圖2具有克隆37-2的IHC。用克隆37染色的ID1+/+野生型小鼠中的MMTV-neu轉(zhuǎn)基因乳腺腫瘤-Id1在血管內(nèi)皮細(xì)胞核中表達(dá)。
?
注:本品僅供研究使用。它不適用于診斷用途或治療應(yīng)用。
?