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Kamiya丨Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉樣蛋白A ELISA說明書

2022-11-28 15:51 作者:艾美捷  | 我要投稿

Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉樣蛋白A ELISA預(yù)期用途

小鼠血清淀粉樣蛋白A ELISA是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)小鼠生物樣品中血清淀粉樣蛋白A(SAA)的定量測定。僅供研究使用。

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引言

銅藍(lán)蛋白是參與銅轉(zhuǎn)運(yùn)的多功能蛋白,也是重要的血清抗氧化劑。在此期間炎癥,創(chuàng)傷性損傷或心肌梗塞,血清銅藍(lán)蛋白水平,作為急性期反應(yīng)物,上升2-3倍。

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Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉樣蛋白A ELISA原理

在該測定中,樣品中存在SAA與已經(jīng)吸附到聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗SAA抗體反應(yīng)。之后通過洗滌除去未結(jié)合的蛋白質(zhì),加入與辣根過氧化物酶(HRP)綴合的抗SAA抗體。該HRP綴合的抗體與先前結(jié)合的SAA形成復(fù)合物。在另一個(gè)洗滌步驟之后通過添加顯色底物3,3',5,5'來測定與免疫吸附劑結(jié)合的酶-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)。結(jié)合酶的數(shù)量與樣品中SAA的濃度成正比測試;因此,450nm處的吸光度是測試樣品中SAA濃度的量度。數(shù)量測試樣品中的SAA可以從校準(zhǔn)器構(gòu)建的校準(zhǔn)曲線內(nèi)插,并進(jìn)行校正樣品稀釋。

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Kamiya艾美捷小鼠血清淀粉樣蛋白A ELISA組件:

1.稀釋劑濃縮物

一瓶含有50毫升5X濃縮稀釋劑運(yùn)行緩沖液。

2.洗滌液濃縮物

一瓶裝有50毫升20X濃縮洗滌液。

3.酶-抗體綴合物濃縮物

一小瓶含有150μL與HRP綴合的100X濃縮親和純化的抗小鼠SAA抗體

穩(wěn)定緩沖器。

4.TMB底物溶液

圖1。

KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY

3 Rev.15092346

一瓶含有12mL TMB和過氧化氫的檸檬酸緩沖液,pH3.3。

5.停止解決方案

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告:避免接觸皮膚。

6.微量滴定板

在孔保持器框架中有12個(gè)可拆卸的8孔條。用親和純化的抗小鼠SAA包被孔。

7.鼠標(biāo)SAA校準(zhǔn)器

一個(gè)小瓶含有凍干的小鼠SAA校準(zhǔn)品。

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試劑制備

1.稀釋劑濃縮物

提供的稀釋劑溶液是5倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水1:5稀釋。

2.洗滌液濃縮物

提供的洗滌溶液是20倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水按1:20稀釋。水晶當(dāng)儲(chǔ)存溫度低時(shí),濃縮物中的形成并不少見。將濃縮物升溫至稀釋前30-35°C可溶解晶體。

3.酶-抗體綴合物濃縮物

通過添加10μL計(jì)算每個(gè)微量滴定板測試條所需的工作共軛溶液量對于用于測試的每個(gè)測試條,酶-抗體與990μL1X稀釋劑綴合。均勻,但輕輕混合。避免起泡。使用前立即稀釋并避光。

4.TMB底物溶液

隨時(shí)可用。

5.停止解決方案

隨時(shí)可用。

6.微量滴定板

KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY?4 Rev.15092346隨時(shí)可用。密封微量滴定袋并從袋中取出板。去除所有會(huì)不用于測定并放回袋中并與干燥劑一起重新密封。

7.鼠標(biāo)SAA校準(zhǔn)器

向凍干的小鼠SAA校準(zhǔn)品中加入1.0 mL蒸餾水或去離子水,輕輕混合直至溶解。這個(gè)校準(zhǔn)器現(xiàn)在的濃度為13.80μg/mL(如果將來,重組校準(zhǔn)器應(yīng)等分并冷凍目的是使用)。根據(jù)下表在使用前立即準(zhǔn)備鼠標(biāo)SAA校準(zhǔn)器?;旌虾迷诿總€(gè)步驟之間。避免起泡。

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Kamiya基于免疫比濁技術(shù)的臨床診斷和研究免疫分析工具,用于脂質(zhì)評估、凝血、炎癥、糖尿病、營養(yǎng)評估和血清蛋白測量。艾美捷科技是Kamiya的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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