研究藥物對腫瘤細胞行為的影響時，經(jīng)常會用到細胞劃痕和Transwell小室實驗。來自武漢大學的任老師在Advanced Healthcare Materials雜志上發(fā)布的文章中就用到了上述實驗，下文是任老師的一些經(jīng)驗分享。

剛開始接觸劃痕和Transwell小室實驗會感覺步驟繁瑣，但網(wǎng)站上有很多實驗方法步驟，都非常詳細，而且基本步驟都差不多，針對自己研究的腫瘤細胞可以多探索，多做幾次熟練一下。

01

劃痕實驗

劃痕實驗是研究腫瘤細胞在經(jīng)過藥物處理后的遷移能力，其成功的關(guān)鍵在于細胞的狀態(tài)。

在對藥物處理完腫瘤細胞后，細胞再次鋪板時，需要掌握好細胞的鋪板密度及狀態(tài)，隔天在細胞長到80-90%后，才能對細胞進行劃痕，否則密度太稀或太密都會影響實驗的成功。另外，采用滅菌的200 ul或10 ul槍頭進行劃痕時，需要根據(jù)自己實驗室現(xiàn)有的槍頭進行判斷采用哪種合適。

02

Transwell小室實驗

Transwell小室實驗，是研究腫瘤細胞經(jīng)過藥物處理后的侵襲能力。

在前期小室中鋪基質(zhì)膠的濃度需要探索好，這也是細胞能否成功侵襲的首要步驟。鋪基質(zhì)膠需要在冰上操作，保證基質(zhì)膠不會提前凝固，基質(zhì)膠在-20℃和室溫下都會發(fā)生凝固，但是4℃是液體狀態(tài)，因此一定要掌握好鋪膠的溫度。

另外，小室膜的孔徑也是細胞侵襲是否能成功的關(guān)鍵。8μm孔徑適合大多數(shù)細胞類型，5μm孔徑適合成纖維細胞或癌細胞（如NIH-3T3和MDA-MAB 231細胞）的亞群也適合單核細胞和巨噬細胞，3μm孔徑適合白細胞或淋巴細胞遷移。因此，針對不同的細胞類型，需要選擇適合的膜孔尺寸。

以上為任老師細胞劃痕和Transwell小室實驗的全部經(jīng)驗分享，希望能對大家有所幫助。同時也歡迎更多老師來稿，分享您的科研干貨和心得體會！