? ? ? ? 放線菌是指能形成分枝絲狀體或菌絲體的一類革蘭氏陽性細菌。放線菌的菌絲體由基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲組成；大多放線菌的菌絲體，緊貼培養(yǎng)基表面或深入培養(yǎng)基內(nèi)生長，叫基內(nèi)菌絲 ( 簡稱“基絲” ) ，基絲生長到一定階段還能向空氣中生長出氣生菌絲 ( 簡稱“氣絲” ) ，并進一步分化產(chǎn)生孢子絲及孢子。有的放線菌只產(chǎn)生基絲而無氣絲。?

? ? ? ?由于基內(nèi)菌絲長入培養(yǎng)基，接種工具不易挑起，所以為了觀察放線菌的形態(tài)特征，入們設計了插片法培養(yǎng)放線菌。

? ? ? ?在高氏1號培養(yǎng)基的平板上扦上滅菌蓋玻片后接種，放線菌能沿著培養(yǎng)基與蓋玻片交界處蔓延生長，而附著在蓋玻片上。

? ? ? ? 所以觀察時，輕輕取出蓋玻片（有菌體的一面朝下），置于干凈的載玻片上，鏡頭放在插入蓋玻片交界處直接鏡檢。這種方法可觀察到放線菌自然生長狀態(tài)下的特征，而且便于觀察不同生長期的形態(tài)。

實驗方法:

插片法培養(yǎng)放線菌

1.制備:高氏固體培養(yǎng)基和滅菌。

2.倒平板：取融化并冷卻至大約 50 ℃左右培養(yǎng)基倒平板 ，平板比正常實驗平板厚些，凝固待用。

3.扦片：以無菌操作用鑷子（無菌手指）將滅菌的蓋玻片以大約 40-50度角扦入瓊脂內(nèi) ，扦片數(shù)量可根據(jù)需要而定。

?4.接種：用接種環(huán)挑取菌種在培養(yǎng)基與蓋玻片交界處瓊脂平板上劃線接種。

5. 培養(yǎng)：將扦片平板倒置， 30-37℃培養(yǎng)，培養(yǎng)時間根據(jù)觀察的目的而定，通常 3~7d 。?

6. 觀察：

（1）拔出蓋玻片；

（2）菌體朝下放入載玻片；

?（3）鏡頭置于蓋玻片培養(yǎng)基交接處進行顯微觀察；

?（4）畫出顯微觀察結果。

實驗步驟:.

插片法培養(yǎng)放線菌

1.制備高氏1號固體培養(yǎng)基和滅菌。

2.倒平板：取融化并冷卻至大約 50 ℃左右倒平板 ，平板比正常實驗平板厚些，凝固待用。

3.扦片

用酒精擦拭工作臺→取出蓋玻片

4.接種

5.觀察

注意事項:

1、倒平板要厚一點。

2、注意無菌操作。