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干貨分享--膿毒癥動物模型的制備方法

2022-06-23 11:31 作者:生物醫(yī)學(xué)實驗外包服務(wù)  | 我要投稿

(1)復(fù)制方法

體重為21~25g的BALB/c小鼠(也可用體重為200g左右的大鼠),雌雄不限。動物適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,實驗前禁食12h。按50mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉后,將動物仰臥固定于手術(shù)板上,腹部手術(shù)區(qū)常規(guī)消毒與去毛,無菌條件下用手術(shù)刀在腹壁作一長約2cm切口,經(jīng)切口進(jìn)腹在回盲瓣遠(yuǎn)端分離并以3號絲線結(jié)扎盲腸,用18號注射針頭于結(jié)扎端穿孔2次,并擠出糞便少許,然后用4號絲線間斷縫合腹膜及皮膚,同時立即皮下注射生理鹽水50ml/kg體重抗休克。

(2)模型特點

造模后小鼠逐漸出現(xiàn)豎毛、腹瀉、膿尿,模型動物表現(xiàn)出飲水、進(jìn)食及活動次數(shù)減少,動物常于術(shù)后12h全身炎性反應(yīng)達(dá)峰值,小鼠活動次數(shù)明顯減少,且活動失去晝夜規(guī)律。應(yīng)用動物進(jìn)行盲腸結(jié)扎穿孔是復(fù)制臨床膿毒癥模型,尤其是胃腸穿孔的最佳動物模型,它能很好地反映出膿毒血癥發(fā)展過程中免疫學(xué)及血流動力學(xué)的雙向變化。

(3)比較醫(yī)學(xué)

膿毒血癥是機(jī)體神經(jīng)、免疫、內(nèi)分泌、凝血等系統(tǒng)功能嚴(yán)重受損后,其中各種有害性刺激(主要是外源性微生物)可激活機(jī)體免疫細(xì)胞,導(dǎo)致大量促炎細(xì)胞因子,如腫瘤壞死因子a(TNFa)、白細(xì)胞介素6(IL6)、生物活性介質(zhì),如一氧化氮(NO)、反應(yīng)性氧自由基(O-2)生成和釋放,進(jìn)而引起炎癥的瀑布樣級聯(lián)反應(yīng),在全身炎性反應(yīng)的進(jìn)行性加重方面起關(guān)鍵作用。目前在膿毒血癥的研究已達(dá)分子水平,臨床上治療手段也日趨完善,但膿毒血癥、膿毒血癥休克、多器官功能不全乃至最終多器官功能衰竭,仍是外科危重患者死亡的主要原因。因此,包括用本方法在內(nèi)建立的腹腔感染動物模型,以及用其他方法復(fù)制的多器官功能不全動物模型、多器官功能衰竭動物模型與人類相關(guān)疾病在疾病的某些特征方面仍有許多相似之處,有較大的研究應(yīng)用價值。


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