ELISA 測試原理及特點
酶免疫分析法（EIA）、酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）是應用最廣泛的免疫測定類型。 ELISA 是一種快速測試，用于檢測樣品中抗原或抗體的存在和數(shù)量。
圖1.Sandwich ELISA
ELISA 之所以如此命名，是因為測試技術(shù)涉及使用酶系統(tǒng)和免疫吸附劑。 ELISA 由與酶結(jié)合的抗體組成； 酶仍然能夠催化反應，產(chǎn)生可見的最終產(chǎn)物。 術(shù)語酶聯(lián)是指酶與抗體的共價結(jié)合。
使用酶作為標記有幾個優(yōu)點：
酶本身在 ELISA 過程中不會發(fā)生變化。 它可以催化許多底物分子的反應，大大放大反應，增強檢測。
酶聯(lián)抗體穩(wěn)定，可以保存較長時間。
有色最終產(chǎn)物的形成允許直接觀察反應或自動分光光度讀數(shù)。
ELISA檢測原理
大多數(shù)為檢測抗原或抗體而開發(fā)的 ELISA 方法包括使用相應的抗體或抗原，這些抗體或抗原牢固地固定在固相上，例如聚乙烯板或聚苯乙烯管的塑料表面。 此類系統(tǒng)也稱為固相免疫吸附測定 (SPIA)。 將測試樣品添加到微量滴定板中，如果測試樣品中存在 Ag 或 Ab，則會發(fā)生 Ag-Ab 反應（與固定化 Ab 或 Ag）。 隨后將酶標抗體添加到反應混合物中，該抗體將與測試抗原或測試抗體的 Fc 部分結(jié)合。 酶系統(tǒng)包括：
酶：辣根過氧化物酶，標記或連接到特定抗體的堿性磷酸酶。
具體基材：
用于過氧化物酶的鄰苯二胺二鹽酸鹽
磷酸對硝基苯酯 (PNPP) - 用于堿性磷酸酶
抗原抗體反應后加入底物。 該酶催化（通常水解）底物以產(chǎn)生顏色終點（在堿性磷酸酶的情況下為黃色化合物）。 顏色的強度與測試樣品中存在的抗體或抗原的量成正比，可以使用 ELISA 讀取器對其進行量化。
ELISA 測試的顯著特點
ELISA 測試由于其簡單性和靈敏度而越來越多地用于檢測抗原（傳染原）或抗體。 它與放射免疫測定 (RIA) 一樣靈敏，并且只需要微升量的測試試劑。 現(xiàn)已廣泛應用于激素、毒素、病毒等多種抗體和抗原的檢測。
ELISA檢測具有高靈敏度和特異性
定量 ELISA 測試的結(jié)果可以直觀地讀取
一次可以完成大量測試
ELISA 專為一次篩查大量標本而設(shè)計，適用于監(jiān)測和集中輸血服務。
用于 ELISA 的試劑穩(wěn)定，可以在地區(qū)和農(nóng)村實驗室分發(fā)，但由于 ELISA 需要先進的設(shè)備和熟練的技術(shù)人員來進行測試，因此它們的使用受到某些情況的限制。
