參考書籍：

1.威廉姆斯血液學(xué)/（美）Kenneth Kaushansky主編；陳竺，陳賽娟主譯.北京：人民衛(wèi)生出版社，2018

2.英漢漢英血液學(xué)詞匯手冊(cè)/吳德沛，包海燕，喬渝森主編. -北京：人民衛(wèi)生出版社，2020

第一篇 臨床評(píng)估?

第三章 骨髓檢查

縮寫：
CD：cluster of differentiation分化群
FISH：fluorescence in situ hybridization熒光原位雜交
MRD：minimal residual disease微小殘留病

英文專業(yè)詞匯：
Immunophenotyping 免疫表型分型
Forward light scatter 前向光散射
Side light scatter 側(cè)向光散射
Blood film 血片
Blood smear血涂片
Bone marrow aspiration 骨髓穿刺
Bone marrow biopsy 骨髓活檢
Bone trabecula 骨小梁
Concentrate blood film 濃縮血片
Feathered edges of the blood film 血片羽毛邊緣
Hyperplasia 增生
hypoplasia增生低下
Promyelocyte 早幼粒細(xì)胞
Puncture 穿刺
Reticulocyte 網(wǎng)織紅細(xì)胞
Ringed sideroblast 環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞
Sectioning 切片
Touch imprint 印片
Vacuole 空泡

一、各項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)
1.骨髓穿刺vs骨髓活檢
骨髓穿刺時(shí)抽取骨髓液涂片檢查
骨髓活檢是取骨髓組織處理后切片檢查，用于對(duì)骨髓增生狀況進(jìn)行定量以及對(duì)骨髓浸潤性疾病進(jìn)行診斷
2.骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)時(shí)診斷惡性血液疾病的金標(biāo)準(zhǔn)，并構(gòu)成對(duì)非惡性疾病的鑒別診斷。
3.免疫組織化學(xué)：以單一細(xì)胞為基礎(chǔ)的表型，效用僅限于抗原決定簇。
4.流式細(xì)胞儀：檢測(cè)細(xì)胞蛋白質(zhì)、細(xì)胞蛋白的量的改變，以及在同一細(xì)胞同時(shí)測(cè)定多種蛋白。
5.基因表達(dá)芯片：分析RNA表達(dá)各級(jí)，以發(fā)現(xiàn)基于基因表達(dá)的診斷格局
6.分子探測(cè)：針對(duì)DNA序列（FISH、PCR、全基因組測(cè)序）
二、骨髓穿刺術(shù)
1.優(yōu)選穿刺部位：髂后上棘、髂前上棘
2.不良反應(yīng)：出血、感染、對(duì)麻醉劑反應(yīng)。骨質(zhì)下結(jié)構(gòu)損傷。
三、骨髓穿刺活檢術(shù)
Jamshidi針具：中空的圓柱狀針具，遠(yuǎn)端同心型錐體，末端銳利、呈斜角的針尖。
四、標(biāo)本制備：骨髓穿刺前需要對(duì)診斷問題認(rèn)真推敲，以便獲得足夠量樣本進(jìn)行所有必要的特殊檢查，從而獲得正確診斷。
1.骨髓涂片：未經(jīng)處理的骨髓穿刺懸液滴到載玻片上立即涂片，適用于骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查和骨髓分類計(jì)數(shù)
2.顆粒涂片：適用于檢查骨髓細(xì)胞增生程度、巨核細(xì)胞數(shù)量
3.濃縮涂片：抗凝骨髓離心后得到濃縮有核細(xì)胞進(jìn)行制備（骨髓增生低下時(shí)檢測(cè)數(shù)量較少的細(xì)胞）
4.活檢印片
5.組織學(xué)切片：石蠟包埋

五、骨髓制片的形態(tài)學(xué)檢查
1.骨髓標(biāo)本是否合適：骨髓穿刺液中含有骨髓顆粒時(shí)針具進(jìn)入髓腔病成功抽取到骨髓的最好證明。
2.骨髓增生程度：
1）定義：骨髓腔內(nèi)造血細(xì)胞所占空間相對(duì)于脂肪及非造血組織所占空間百分比
2）正常比例：兒童80%，30歲50%。以同年齡正常人作為對(duì)照評(píng)估患者骨髓增生程度。
3）骨髓顆粒是增生程度的最佳指示，由骨髓穿刺制備的骨髓顆粒檢查結(jié)果與骨髓活檢所得結(jié)果之間有比較好的一致性。
4）結(jié)果分析：
（1）紅系細(xì)胞：低倍觀察，簇狀排列
（2）巨核系：低倍觀察，散在分布
（3）粒紅比例：2:1-4:1（不能用濃縮涂片）
5）骨髓浸潤性疾病：
（1）惡性腫瘤：
①非造血系統(tǒng)腫瘤轉(zhuǎn)移在骨髓活檢中的特征是骨髓結(jié)構(gòu)的破壞，伴有細(xì)胞形態(tài)學(xué)異常的細(xì)胞群。
②腫瘤細(xì)胞緊密黏附成簇有助于識(shí)別腫瘤特征
③異常淋巴細(xì)胞聚集：
a、細(xì)胞學(xué)非典型性
b、細(xì)胞群體形態(tài)單一性
c、常見于骨小梁附近
d、免疫組化、FISH鑒別漿細(xì)胞骨髓瘤和淋巴組織增生性疾病
（2）纖維化：骨髓活檢標(biāo)本中識(shí)別
①特征：骨髓網(wǎng)網(wǎng)狀纖維染色增加
②可伴隨原發(fā)造血疾患或浸潤性（腫瘤轉(zhuǎn)移）
（3）儲(chǔ)存型疾病：Gaucher病、NieMann-Pick病——可見不同類型儲(chǔ)存物質(zhì)的異常巨噬細(xì)胞
（4）淀粉樣變：形成β折疊片的二級(jí)結(jié)構(gòu)的改變而產(chǎn)生的不溶于水的細(xì)胞外蛋白，剛果紅染色陽性
6）感染：
（1）單核細(xì)胞內(nèi)：利什曼原蟲、組織胞漿菌、弓形蟲
①播散性利什曼?。汗撬桤R檢和培養(yǎng)是最敏感的診斷方法
②分枝桿菌：骨髓培養(yǎng)檢測(cè)
③播散性組織胞漿菌?。汗撬栊螒B(tài)學(xué)是敏感方法
（2）骨髓肉芽腫：骨髓活檢發(fā)現(xiàn)
7）壞死和膠原樣變
（1）骨髓壞死：鐮刀細(xì)胞貧血病、累及骨髓的惡性疾病
（2）骨髓膠原樣變：存在無形的胞外物質(zhì)，脂肪萎縮，骨髓增生低下

六、造血系列的形態(tài)學(xué)區(qū)分
骨髓分類計(jì)數(shù)需要檢查300-500個(gè)有核細(xì)胞
1.髓系（粒系）
2.單核系：在評(píng)估MDS和急性白血病時(shí)被等同于原始細(xì)胞
3.巨噬細(xì)胞
噬血細(xì)胞性巨噬細(xì)胞：自免溶貧的特征
4.紅系
5.儲(chǔ)存鐵評(píng)估：普魯士藍(lán)進(jìn)行染色
1）選擇的細(xì)胞：骨髓巨噬細(xì)胞
2）病理性環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞：鐵顆粒數(shù)量增多，排成環(huán)狀，圍繞至少1/3細(xì)胞核
6.巨核系
7.淋巴系
8.漿系
9.肥大細(xì)胞
10.破骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞

七、流式細(xì)胞儀
1.概述
1）使用了針對(duì)分化抗原簇（CD）的熒光標(biāo)記單克隆抗體這一主要診斷工具。
2）免疫表型分析數(shù)據(jù)（細(xì)胞膜表面，胞質(zhì)內(nèi)、細(xì)胞核抗原表達(dá)）時(shí)血液系統(tǒng)惡性疾病診斷和分型的關(guān)鍵決定指標(biāo)。
2.基本原理：詳見視頻
四色到六色分析、側(cè)向和前向光散射分析。

3.MRD的評(píng)估：預(yù)后標(biāo)志物
4.疾病鑒別診斷（有些細(xì)胞具有階段特異性）
1）骨髓中未成熟細(xì)胞群體：CD34、CD117
2）未成熟的T細(xì)胞前體：CD34、CD8
3）APL：HLA-DR表達(dá)缺失
4）漿細(xì)胞骨髓瘤：高水平CD56、CD117
5）T細(xì)胞淋巴瘤：丟失了CD7、CD26
6）CLL：細(xì)胞膜免疫球蛋白、CD20表達(dá)弱
7）MDS：CD34+細(xì)胞比例增加，CD34+B祖細(xì)胞減少。

本文僅供學(xué)習(xí)交流使用，不能作為診斷、治療的依據(jù)，請(qǐng)謹(jǐn)慎參閱