“眾所周知，PCR是生化實驗室基本的實驗方法?！?/p>

實驗結(jié)果卻總是不盡如意，有可能是PCR塑料耗材微量的污染，或者是抑制劑的引入造成的實驗干擾。

還有一個很重要的原因：耗材選擇不當(dāng)也會對實驗結(jié)果造成很大的影響。

你看，PCR耗材類型眾多：8連管、低容管、標(biāo)準(zhǔn)管、無裙邊、半裙邊，全裙邊，升孔緣等一系列的PCR及qPCR板。

今天，小編用心整理了PCR耗材選擇常見問題。

常見問題解析-----------------------------------

問：PCR耗材為什么一般都是PP材質(zhì)的呢？

PCR/qPCR耗材一般都是聚丙烯（PP）材質(zhì)，因其為生物學(xué)惰性材料，表面不易于粘附生物分子，且有著良好的化學(xué)耐性，及溫度耐受性（可121度高壓滅菌，也可以承受熱循環(huán)過程中的溫度變化）。這些材料通常會與試劑或者樣品直接接觸，因而在生產(chǎn)制備過程中需要選用高質(zhì)量的材料和良好的加工工藝。

問：不同體積的PCR 管/板，我該怎么選呢？

PCR管的體積大多數(shù)都可以滿足PCR反應(yīng)要求。但是在滿足實驗要求的基礎(chǔ)上，優(yōu)先推薦選用低容管哦。因為低容反應(yīng)管/板有著較小的上方空間，可提高熱傳導(dǎo)率并降低蒸發(fā)。而且在加樣時，需要避免加樣過量或過少。過量會導(dǎo)致熱傳導(dǎo)率下降，溢出及交叉污染，而加樣過少可能會造成樣品蒸發(fā)損失。大家可依據(jù)具體的實驗要求選用更合適的產(chǎn)品。

常見反應(yīng)管規(guī)格及體積：
單管/聯(lián)管：0.5mL，0.2mL， 0.15mL
96孔板：0.2mL， 0.15mL
384孔板：0.04mL

問：為何有的PCR管是平蓋，有的是凸蓋呢

當(dāng)樣品量較少時，都會優(yōu)先選用單管或者連管。但是當(dāng)反應(yīng)體積需求較大時，單管可達到0.5mL呢。平蓋和凸蓋各有優(yōu)點呢，可參考下面的信息。

問：不同顏色的PCR 管/板，我該怎么選呢？

對于普通的PCR反應(yīng)選用透明或者彩色的PCR管都是可以的，而彩色透明的PCR管更有助于進行樣品分類管理哦。

但qPCR更推薦選用優(yōu)質(zhì)的白色PCR耗材。
由于qPCR需要實時定量檢測熒光信號強度，更需要靈敏、精確的熒光信號傳遞。與傳統(tǒng)的透明PCR產(chǎn)品相比，白色PCR產(chǎn)品可最大程度地反射熒光信號，減少孔間信號交叉污染，可優(yōu)化實時熒光定量PCR的結(jié)果。

來源：“藥物微生物檢驗”公眾號

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