為華生物在普通Cy5/3染料的發(fā)色團(tuán)上加入磺酸基團(tuán)增加了CY5/3染料的水溶性
磺化Cy染料是在普通Cy染料的發(fā)色團(tuán)上加入磺酸基團(tuán)從而大大增加了染料的水溶性。另外磺化Cy染料還稍微提高了染料的光學(xué)穩(wěn)定性和量子產(chǎn)率,因此磺化染料更耐受光照,發(fā)出的熒光也稍強(qiáng)一些。由于磺酸鹽的原因,這類染料的水溶性非常高, 在標(biāo)記反應(yīng)中不需要加入任何有機(jī)溶劑助溶,另外標(biāo)記上去的染料分子由于水溶性好不會(huì)聚集,也不會(huì)影響被標(biāo)記大分子的穩(wěn)定。
目前為華生物可提供的磺化Cy染料包括sulfo-Cy3,sulfo-Cy3.5, sulfo-Cy5, sulfo-Cy5.5, sulfo-Cy7和sulfo-Cy7.5?;腔疌y染料的熒光譜圖(包括激發(fā)峰和發(fā)射峰)發(fā)生了非常細(xì)小的藍(lán)移,這是一個(gè)非常普遍的現(xiàn)象,比如Rhodamine 123 到Alexa Fluor? 488,這個(gè)藍(lán)移非常小,藍(lán)移后激發(fā)峰和發(fā)射峰仍在儀器的檢測(cè)范圍之內(nèi),所以不影響使用,也不必改設(shè)儀器參數(shù)。
盡管普通Cy和磺化Cy染料在熒光光學(xué)性質(zhì)上非常相似,但它們?cè)谶m用條件和標(biāo)記方法上仍有所不同。普通Cy染料水溶性低,必須預(yù)先溶解在有機(jī)溶劑(比如DMF或DMSO)中,然后加入到標(biāo)記反應(yīng)體系中,有機(jī)溶劑在有機(jī)/水混合溶劑中的含量需要達(dá)到10-15%(體積比率)才能保證染料不析出。
但是磺化Cy染料在水中溶解性很好,可直接在水溶液(比如PBS緩沖液)中標(biāo)記,因此特別適用于蛋白等對(duì)有機(jī)溶劑敏感的標(biāo)記對(duì)象。如果希望反應(yīng)后通過透析的方式純化,務(wù)必使用磺化-Cy染料,磺化-Cy染料溶于水,多余的染料可以被透析出。如果通過離子交換樹脂、電泳、凝膠過濾法純化,普通Cy和磺化-Cy都適用。
為華生物CY系列熒光染料的衍生材料有:
DOPE-CY5.5 二油酰磷脂酰乙醇胺-CY5.5
DOPE-PEG-CY5 二油酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇CY5
DOPE-EPG-CY3 二油酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-CY3
DOPE-EPG-CY7 二油酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-CY7
DSG-PEG2000-CY7 二硬脂酰-rac-甘油-聚乙二醇 2000-CY7
DSG-PEG-CY5二硬脂酰-rac-甘油-聚乙二醇-CY5
DSG-PEG-CY3 二硬脂酰-rac-甘油-聚乙二醇-CY3
DSG-PEG-CY5.5 二硬脂酰-rac-甘油-聚乙二醇-CY5.5
PLGA-CY7 聚(D,L-丙交酯-co-乙交酯)CY7
PLGA-PEG-cy5 CY5-聚乙二醇-聚(D,L-丙交酯-co-乙交酯)
PLGA-PEG-CY7 CY7-聚乙二醇-聚(D,L-丙交酯-co-乙交酯)
DSPE-PEG-CY5/CY5.5/CY3/CY7/CY3.5
Cy5-PEG-Silane?cy5-聚乙二醇-硅
葉酸-PEG-cy3
RB-PEG-多巴胺
CY5-PEG-多巴胺
CY5.5-PEG-COOH/nh2/mal/疊氮N3
CY3/CY5.5-PEG-Mal?CY3/CY5.5-聚乙二醇-馬來酰亞胺
CY5/CY5.5-PEG-OPSS?CY5/CY5.5-聚乙二醇-巰基吡啶