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百螢 檢測(cè)細(xì)胞功能的有用工具---------Annexin V-iFluor 633標(biāo)記

2023-05-09 11:06 作者:百螢生物  | 我要投稿

1.?百螢 Annexin V-iFluor 633標(biāo)記參數(shù):

E x (nm)? ? ? ? 640

E m (nm) ??????654

分??子 量? ? ? ??~36000

溶? ? ??劑? ? ? ??Water

存儲(chǔ)條件 ??????在零下15度以下保存,避免光照


2.?百螢 Annexin V-iFluor 633標(biāo)記概述及應(yīng)用

? ????Annexin V-iFluor 633標(biāo)記是美國(guó)AAT Bioquest研發(fā)的用于檢測(cè)細(xì)胞功能的探針,膜聯(lián)蛋白是鈣依賴性磷脂結(jié)合蛋白家族。 它們富含真核生物,屬于參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的普遍存在的細(xì)胞質(zhì)蛋白家族。 膜聯(lián)蛋白V的優(yōu)先結(jié)合配偶體是磷脂酰絲氨酸(PS),其通常保持在細(xì)胞膜的內(nèi)葉(細(xì)胞質(zhì)側(cè))。 在細(xì)胞凋亡中,PS被轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜的外部小葉。 磷脂酰絲氨酸在細(xì)胞表面上的出現(xiàn)是細(xì)胞凋亡的初始/中間階段的通用指示,并且可以在觀察到形態(tài)變化之前檢測(cè)到。 我們的膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物是一組監(jiān)測(cè)細(xì)胞功能的工具,旨在通過(guò)測(cè)量磷脂酰絲氨酸的易位來(lái)監(jiān)測(cè)細(xì)胞凋亡。

? ? ? ?膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物在Ca2+存在下與凋亡細(xì)胞表面上的PS結(jié)合,它也可以通過(guò)壞死細(xì)胞膜或死細(xì)胞并與細(xì)胞內(nèi)部的PS結(jié)合。 因此,我們建議將細(xì)胞不可滲透的核染色與膜聯(lián)蛋白V結(jié)合物結(jié)合使用,以區(qū)分死細(xì)胞和凋亡細(xì)胞。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商,為您提供優(yōu)質(zhì)的Annexin V-iFluor 633檢測(cè)試劑。


3.?數(shù)據(jù)分析

? ? ? ?下圖是使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸在Jurkat細(xì)胞凋亡中的結(jié)合活性的實(shí)例。 在活的非凋亡細(xì)胞中,膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450檢測(cè)非誘導(dǎo)細(xì)胞中的先天性細(xì)胞凋亡,其通常為所有細(xì)胞的2-6%。 在凋亡細(xì)胞中,膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450與磷脂酰絲氨酸結(jié)合,磷脂酰絲氨酸位于細(xì)胞膜的外部小葉上,導(dǎo)致染色強(qiáng)度增加。

圖1.在Jurkat細(xì)胞中檢測(cè)膜聯(lián)蛋白VmFluor Violet 450和磷脂酰絲氨酸的結(jié)合活性。 將Jurkat細(xì)胞在37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中不用(藍(lán)色)或用1μM星形孢菌素(紅色)處理5小時(shí),然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分鐘。 使用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式細(xì)胞儀,使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下測(cè)量膜聯(lián)蛋白V-mFluor Violet 450的熒光強(qiáng)度。

4.參考文獻(xiàn)

Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors:?Brad Larson, Peter Banks
Journal:?Experimental Biology (2017)

Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors:?Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal:?Journal of Controlled Release (2017)





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