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siRNA篩選小文庫,確定不來一套試試嗎?

2022-05-12 09:57 作者:分子科普小feng子  | 我要投稿

小刀今天踏著七彩祥云,帶著siRNA文庫來咯~

確實,這不是我第一次叨叨siRNA文庫了,只是我實在不忍心這么好的東西還沒有被大家看到!

所以,無論如何我今天都要當(dāng)一回優(yōu)寧維“李佳琦”,全方面給大家展示siRNA文庫的功能性、實用性及其可操作性!

1.?siRNA文庫展現(xiàn)形式:

? 每塊96孔板設(shè)有80個基因的siRNA,陣列排布于第2列至第11列

?第1列和第12列為空,可根據(jù)實驗需要自行設(shè)置相應(yīng)的對照

TIPs: 小文庫基因數(shù)大概在100左右,所以到手也就一兩塊96孔板


2.?siRNA文庫溶解稀釋方法:

??用排槍直接將無RNA酶的水添加至96孔板中,稀釋至母液濃度

??根據(jù)實驗需求,等分成多塊96孔板子板,避免反復(fù)凍融

??用量:以0.1nmol規(guī)格,母液稀釋濃度2uM,使用終濃度為25nM為例:96孔板篩選(100ul/孔),每次篩選需進(jìn)行3個重復(fù),共需用到4ul左右。(可支持約10次篩選)

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3.?siRNA文庫篩選操作方法:

??反向轉(zhuǎn)染兩步法操作——轉(zhuǎn)染當(dāng)天配制轉(zhuǎn)染復(fù)合物,隨后加入細(xì)胞懸液

??整個過程只需1把排槍和1塊96孔板,簡直不要太簡單奧!

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4.?siRNA文庫篩選檢測方法:

??表型變化檢測:細(xì)胞活力、細(xì)胞遷移、細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞周期分析等

??mRNA水平檢測:qPCR,?microarray analysis, northern blotting

??蛋白水平檢測:western?blot,?immunofluorescence, FACS analysis

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小刀以之前和大家分享過的siRNA去泛素化酶小庫為例:

當(dāng)然,除了去泛素化酶小庫以外,我們還提供各種類型大庫、中庫、小庫和小小庫。小刀把它們?nèi)苛_列出來,有需要的老師可以聯(lián)系身邊的優(yōu)寧維銷售,還有對應(yīng)的基因列表供您參考挑選哦~!

最近siRNA文庫大放價,小文庫買起來就更劃算了喂,確定不來一套試試看嗎?

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更多精彩,可咨詢:優(yōu)寧維分子生物學(xué),公眾號


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