Fluo-4 AM 是一種常用的檢測細(xì)胞內(nèi) Ca2+ 濃度的探針。儲存方式：避光。

　　MCE 的所有產(chǎn)品僅用作科學(xué)研究或藥證申報，我們不為任何個人用途提供產(chǎn)品和服務(wù)

　　NP細(xì)胞用5 μM Fura-4-AM在37°C的黑暗條件下孵育30分鐘。使用特定的Ca2+敏感熒光指示劑Fura-4-AM測量細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平，并通過熒光顯微鏡進(jìn)行分析

　　生物活性

　　體外研究

　　fluo - 4am是一種熒光染料（λex=494 nm， λem=516 nm）。預(yù)加載fu -4 AM，觀察到非常明亮的熒光圖像。在裝載了氟-3 am的細(xì)胞的平行實(shí)驗中，得到的熒光圖像雖然在這種情況下清晰可辨，但亮度較低。指導(dǎo)方針（以下是我們推薦的方案。本協(xié)議僅提供了一個指南，應(yīng)根據(jù)您的具體需求進(jìn)行修改）。

　　1. 細(xì)胞計數(shù)，每個樣品取106個細(xì)胞（對照和實(shí)驗/秒）。

　　2. 收集細(xì)胞（5分鐘，3000×g, 4°C），在PBS中洗滌一次。

　　3.將細(xì)胞重懸于0.5 ml PBS中，加入0.5 μl Fluo-4-AM （1 mM原液）至終濃度為1 μM。37℃孵育1小時。

　　4. 用PBS洗滌細(xì)胞三次（2分鐘，3000×g），最后用1ml PBS重懸。分離成2根流式細(xì)胞儀管，每根0.5 ml。

　　5. 用流式細(xì)胞術(shù)評價染色結(jié)果，用CellQuest等軟件分析數(shù)據(jù)。

　　MCE尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。僅供參考。

　　通過酶切分離心肌細(xì)胞，并在37°C下負(fù)載Fluo 4-AM （5 μM） 20 min。用共聚焦顯微鏡記錄Fluo 4-AM在25°C下的熒光變化。

　　實(shí)驗參考方法?

　　細(xì)胞試驗? 參考來源：https://www.activeinhibitor.com/cck8/1127.html

　　為了測量懸浮細(xì)胞的熒光，將大鼠嗜堿性白血?。≧BL）細(xì)胞培養(yǎng)物的細(xì)胞稀釋至2至3×106。細(xì)胞懸浮于1 μM染料（包括fluo - 4am）中，37°C孵育30分鐘。然后將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中，用熒光光譜儀測量熒光發(fā)射強(qiáng)度。

　　MCE尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。僅供參考。