Frdbio HRP快速標(biāo)記試劑盒

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產(chǎn)品貨號：ARL0010K??? ??????????????????????????????????????

主要組分：??????????

辣根過氧化酶(HRP ，Activated) (10mg/mL)? ? ? ? ? ? ? ? ? 0.5mg/1mg/5mg

標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 5.0mL/15mL/30mL*2

標(biāo)記終止液干粉(Stop Buffer Powder)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 2.5mg/2.5mg*2/2.5mg*5

標(biāo)記物保存液(Labeled Product Buffer)? ? ? ? ? ? ? ? ?2.0mL/2mL*2/10mL

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適用范圍：

本試劑盒適用于帶有游離氨基的物質(zhì)的標(biāo)記，比如：帶有游離氨基（伯胺）的小分子化合物，蛋白或者抗體。

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產(chǎn)品簡介：

本試劑盒原理：采用改良的碘氧化法活化辣根過氧化物酶（HRP），經(jīng)過氧化以后活化的HRP可以與待標(biāo)記物的游離氨基結(jié)合，發(fā)生希夫堿反應(yīng)（Schiff's base reaction）。本試劑盒適用于帶有游離氨基的物質(zhì)的標(biāo)記，比如：帶有游離氨基（伯胺）的小分子化合物，蛋白或者抗體。

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儲存條件：

該試劑盒在低溫下運輸，收到后請置于2-8℃保存，保存時間3個月。

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注意事項：

此時準備待標(biāo)記物：待標(biāo)記物以0.01M pH7.4 PBS環(huán)境為佳，不應(yīng)含有甘油、疊氮鈉、氨基物質(zhì)（包括甘氨酸、Tris 等），EDTA等物質(zhì)。如果含有以上物質(zhì)，需用0.01M pH7.4 PBS 緩沖溶液進行充分透析或者超濾管超濾以除去以上物質(zhì)保證標(biāo)記效率；調(diào)整待標(biāo)記物的濃度至適當(dāng)?shù)臐舛?，抗體調(diào)整的濃度為2mg/mL左右；對于小分子物質(zhì)需要實驗者摸索濃度，保證HRP的比例過量，如果不能確保HRP過量的話，標(biāo)記完之后最好透析或者過濾除去未標(biāo)記的小分子物質(zhì)。

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產(chǎn)品使用方法：

1.??標(biāo)記前準備：

從4℃取出HRP標(biāo)記試劑盒，室溫條件下平衡30分鐘，使各組分充分解凍后混勻。

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2.標(biāo)記反應(yīng)：

向待標(biāo)物的溶液中加入1/10體積的標(biāo)記緩沖液，用移液槍反復(fù)吹打幾次以充分混勻，避免產(chǎn)生氣泡；取等量辣根過氧化酶到待標(biāo)記物中，用移液槍反復(fù)吹打幾次以充分混勻，避免產(chǎn)生氣泡，室溫避光反應(yīng)2小時左右。

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3.標(biāo)記反應(yīng)終止：

將反應(yīng)終止液干粉管中加入1mL去離子水配成反應(yīng)終止液[2.5mg/ml]，取適量的反應(yīng)終止液加入步驟2的反應(yīng)液中，比例為：每10μL反應(yīng)液加入1μL反應(yīng)終止液。充分混勻，室溫放置1 小時。

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4.標(biāo)記物產(chǎn)物收集與保存：

終止完成后，加入等體積的標(biāo)記物保存液，充分混勻，置于-20℃保存。

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附表：抗體標(biāo)記用量參考表（本表僅做參考）

產(chǎn)品編號

HRP酶量

可標(biāo)記抗體量

最佳反應(yīng)體積

ARL0010K-500

500 μg

500 - 2000 μg

500 μl

ARL0010K-1000

1000 μg

1000 - 4000 μg

1000 μl

ARL0010K-5000

5000 μg

5000 - 20000 μg

5000 μl

標(biāo)記比例：（抗體:HRP標(biāo)記質(zhì)量比為?1：1；抗原:HRP質(zhì)量比為1：4左右）；

聲明：本表只做參考，具體還是需要實驗人員根據(jù)實際情況摸索條件。

*本試劑僅供實驗室研究使用