清華平臺(tái)筆記：

1.FCS不能絕對(duì)計(jì)數(shù)，除非買絕對(duì)計(jì)數(shù)的工具或者上樣量體積確定的FCS。

2.鞘液如果是分選要用細(xì)胞等滲的PBS，如果只是分析用無(wú)菌水即可?！疽?yàn)樵诹鲃?dòng)室細(xì)胞流和鞘液這兩種液體是層流（因?yàn)闃颖玖鞅惹室核俣却螅┑臅r(shí)候，兩種液體不會(huì)混合，細(xì)胞不會(huì)死，不影響檢測(cè)；但是之后會(huì)混在一起，細(xì)胞會(huì)死。而且長(zhǎng)時(shí)間用PBS會(huì)結(jié)晶，因此選無(wú)菌水?！?/p>

3.流動(dòng)室：空間正交結(jié)構(gòu)；封閉透明照射室。前者沒(méi)擋板，后面有擋板。

高速上樣和低速上樣的區(qū)別：上樣速度并不變，單位時(shí)間進(jìn)的細(xì)胞多，只是軸流寬度變大，同時(shí)檢測(cè)的細(xì)胞多，檢測(cè)的誤差會(huì)大。

△樣品很稀可以選擇高速，細(xì)胞多的話選低速即可。細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)只能選低速，否則數(shù)據(jù)假。

4.光學(xué)系統(tǒng)

光電倍增管PMT：光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào)，并按比例放大這個(gè)信號(hào)。

△調(diào)電壓就是調(diào)PMT的級(jí)聯(lián)放大

細(xì)胞死亡皺縮，SSC變??；還會(huì)變成碎片，F(xiàn)SC變小?？梢愿鶕?jù)FSC和SSC來(lái)看細(xì)胞狀態(tài)。

激發(fā)一般用單個(gè)值，發(fā)射一般用范圍。

除了細(xì)胞周期坐標(biāo)是線性的，其他都是log。

還可以導(dǎo)出PDF和experiment，就是圈門的方式。

陰性一般在10^3左右，一般調(diào)到10^2；陽(yáng)性10^4。