可能不少小伙伴都有這樣的疑惑，“我的目的蛋白做WB沒有條帶或者條帶特別淡，做IHC也沒有陽性結(jié)果，嘗試了不同稀釋比的抗原，一抗，二抗，更換了不同廠家生產(chǎn)的抗體，結(jié)果還是不好，內(nèi)參和其他蛋白都有正常的結(jié)果，why？”

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這里你就要考慮一下，是不是目的蛋白本身的表達(dá)量就非常低，增加抗體濃度的作用也是非常有限的，zui終有小伙伴領(lǐng)悟了，然后又看到了相關(guān)文獻(xiàn)，報道該目的蛋白在正常樣本種表達(dá)量確實特別低，都到皮克級別了，難怪常規(guī)的WB和IHC檢測結(jié)果不好...

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于是接下來，他們試用了一種多聚HRP標(biāo)記的二抗，成功檢測到了陽性結(jié)果。到這里，你是不是要問，是什么好東西這么神奇？接下來我們展開說：

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Poly HRP是一種增強信號的酶標(biāo)記物，由共價辣根過氧化物酶（HRP）聚合物組成。目的蛋白的信號通過抗體傳遞給Poly HRP上攜帶的大量HRP分子，然后HRP分子作用于底物釋放信號，使得目的蛋白檢測信號得到放大，這些信號放大程度與HRP聚合范圍成正比，從而可以利用多聚HRP在免疫分析中檢測到低豐度蛋白（pg級別范圍）。

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鏈霉親和素-poly HRP綴合物（SA－PolyHRP）由五個相同的HRP同聚物組成，同時與多個鏈霉親和素分子共價偶聯(lián)。目前生產(chǎn)過程中使用了三種不同的同聚物，它們分別是PolyHRP20、PolyHRP40和PolyHRP80。鏈霉親和素-PolyHRP80比鏈霉親和素-PolyHRP40靈敏度更高，鏈霉親和素-PolyHRP40比鏈霉親和素-PolyHRP20靈敏度更高。

不同尺寸HRP多聚體示意圖

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用鏈霉親和素-PolyHRP技術(shù)檢測技術(shù)標(biāo)記非常簡單，可以將它們結(jié)合到現(xiàn)有的測定系統(tǒng)中，現(xiàn)有的步驟，孵育間隔等幾乎不需要改變。所需試劑基本上與使用標(biāo)準(zhǔn)鏈霉親和素-HRP進(jìn)行的常規(guī)ELISA相同。類似地，PolyHRP幾乎可用于任何以HRP底物開發(fā)的檢測系統(tǒng)（比色法、熒光法、包括化學(xué)發(fā)光），這也意味著與現(xiàn)有的ELISA和IHC儀器完全兼容。PolyHRP檢測可能有利的其他分析方法包括高靈敏度DNA/RNA雜交分析和配體受體分析。

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最后，小編給大家推一下艾美捷Fitzgerald的多聚HRP相關(guān)研究工具，包括鏈霉親和素-polyHRP（Streptavidin Poly-HRP），polyHRP標(biāo)記的各類二抗等等。

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Fitzgerald成立于1989年,?總部位于美國馬薩諸塞州的阿克頓（Acton），Acton是他們主要的銷售團隊，實驗室以及分銷中心的所在地。Fitzgerald還在全球范圍內(nèi)設(shè)有制造工廠，包括加利福尼亞，紐約，加拿大和愛爾蘭。Fitzgerald是一家著名的一抗，二抗，重組和天然蛋白，ELISA試劑盒，血清和血漿以及其他生物試劑的供應(yīng)商，是較早進(jìn)入國內(nèi)診斷市場的國際品牌之一，產(chǎn)品種類豐富，是體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)的原料供應(yīng)商。

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作為Fitzgerald在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的Fitzgerald產(chǎn)品。

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文章來源：https://www.amyjet.com/featured/polyhrp.shtml