今天瑞禧生物小編給大家整理分享的內(nèi)容是負(fù)載BMP-2,VEGF和TGF-β的殼聚糖納米水凝膠緩釋系統(tǒng)/聚多巴胺功能化殼聚糖水凝膠的研究制備方法，和小編一起來(lái)看！

負(fù)載BMP-2,VEGF和TGF-β的殼聚糖納米水凝膠緩釋系統(tǒng)制備方法:

采用離子交聯(lián)法制備負(fù)載BMP-2,VEGF或TGF-β的殼聚糖納米緩釋微球,利用殼聚糖制作溫敏性微孔水凝膠,將負(fù)載生長(zhǎng)因子的納米緩釋微球包裹入水凝膠內(nèi),制備出負(fù)載BMP-2,VEGF和TGF-β殼聚糖納米微球水凝膠雙重緩釋系統(tǒng).體外培養(yǎng)小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞(MC3T3-E1),第一階段實(shí)驗(yàn)以成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基(oeteogenic medium,OM)中添加BMP-2,VEGF和TGF-β的不同組合方式設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)分組,以單純OM培養(yǎng)基為對(duì)照組;第二階段實(shí)驗(yàn)以O(shè)M培養(yǎng)基中添加不同組合的負(fù)載BMP-2,VEGF和TGF-β的殼聚糖納米緩釋系統(tǒng)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)分組,以單純O M培養(yǎng)基為對(duì)照組.使用電鏡,粒度儀及Elisa試劑盒等分析納米微球粒徑,形態(tài)和釋放曲線等.

采用CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的體外增殖能力,成骨效果檢測(cè)采用堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及其活性定量檢測(cè),茜素紅染色和礦化沉積定量分析4種方法.采用RT-PCR檢測(cè)成骨相關(guān)基因RUNX2,ALP和OCN的表達(dá)情況,Western blot檢測(cè)成骨誘導(dǎo)相關(guān)信號(hào)通路的表達(dá).

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RXYWX.2022.6.30