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研究miRNA,到底是研究5p成熟體還是3p成熟體呢?

2023-06-05 15:40 作者:小恒學(xué)術(shù)  | 我要投稿

我們在研究miRNA的時候,比如hsa-miR-296,但在查找序列時,發(fā)現(xiàn)有hsa-miR-296有兩個成熟體,hsa-miR-296-3p和hsa-miR-296-5p,可是文獻(xiàn)中一般只會說hsa-miR-296,這樣的話到底是做哪個?是3p還是5p呢?

這里,漢恒生物小編就和大家說說miRNA的3p和5p之間的區(qū)別。

首先,什么是miRNA呢?

miRNA (microRNA)是一組由基因組編碼的長度約20~25個核苷酸的非編碼RNA,通過和靶基因mRNA堿基配對引導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)降解mRNA或阻礙其翻譯。在miRNA公共數(shù)據(jù)庫miRBase (http://www.mirbase.org/)中已經(jīng)有1W多條來自不同物種的miRNA序列。

那它是怎么來的呢?

是由約70個堿基大小形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)的單鏈RNA前體 (pre-miRNA),經(jīng)過Dicer酶酶切加工后,成為長約20~25nt的成熟miRNA,如下圖所示:

圖1,miRNA結(jié)構(gòu)圖

有的miRNA前體兩個臂分別產(chǎn)生一條有功能的成熟miRNA,他們分別靶向不同的位點。這時候就要來進(jìn)行區(qū)分了,一般以“-5p”和“-3p”分別命名,如hsa-miR-296-5p和hsa-miR-296-3p,分別表明從hsa-mir-296前體的5’端臂和3’端臂加工而來的。表達(dá)水平較高的miRNA后面不加任何符號,而表達(dá)水平較低的miRNA后面加上*號,有時帶“*”的miRNA就根本不出現(xiàn)。但對于hsa-miR-296-3p和hsa-miR-296-5p則都沒有帶*號,表明兩個成熟體都有可能存在且表達(dá)量都不低。

而發(fā)夾狀結(jié)構(gòu)的miRNA前體轉(zhuǎn)錄本以“mir”命名,其編號以“MI”編號,如人的miRNA296的前體ID為hsa-mir-296,Accession為MI0000747。如下圖所示。

圖2,hsa-mir-296前體

圖3,hsa-mir-29b-1成熟體

所以針對最初問題,可以從兩個途徑來確定:

  1. 查文獻(xiàn):

如果參考的文獻(xiàn)中有他所用的hsa-miR-296序列或者Accession number,直接拿序列與現(xiàn)在的hsa-miR-296-5p以及hsa-miR-296-3p比較即可,這樣最準(zhǔn)確;

? ?2.? 查mirbase數(shù)據(jù)庫:

如果參考的文獻(xiàn)沒有給出具體序列,只是寫hsa-miR-296,那上mirbase數(shù)據(jù)庫查hsa-miR-296,雖然他會列出hsa-miR-296-5p以及hsa-miR-296-3p兩個不同的miRNA成熟體,但在下面有寫Previous IDs,這樣就能知道之前的hsa-miR-296是現(xiàn)在的5p還是3p(如上圖所示),顯然這里是指的hsa-miR-296-5p。

以上就是兩個miRNA成熟體的選擇方法,如果有其他的疑問,歡迎咨詢漢恒生物!

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