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關(guān)于胎牛血清的7問7答

2023-02-10 13:49 作者:健微講堂  | 我要投稿

Q:血清應(yīng)如何保存?

未拆封的血清應(yīng)存放于 -15?℃至 -20 ℃,避免反復(fù)凍融。拆封后的血清應(yīng)無菌分裝成一次的用量并存放于 -15?℃至 -20 ℃,2~8 ℃ 溶解后建議盡快使用。


Q:血清的有效期是多久?

大部分血清效期是 5 年,針對每個批次,請通過質(zhì)檢文件確定具體效期日期。


Q:血清應(yīng)如何融解?

取出的血清置于 2~8 ℃ 融化,不時旋轉(zhuǎn)混勻,充分融解后分裝或使用。

Q:血清中出現(xiàn)絮狀沉淀是何原因?如何處理?

多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成,最常見的原因之一是融化過程中,脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質(zhì)量??梢?400 g 離心 5 分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般最常用的是 0.22 um PES 材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。


Q:為什么存放于冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?如何避免?

在 2~8°C 條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時處于溶解狀態(tài),在凍融過程中會發(fā)生聚集,形成肉眼可見的沉淀。但該現(xiàn)象一般不會影響血清的性能??梢?400 g 離心 5 分鐘,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,一般最常用的是 0.22 um PES 材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于 -15° 至 -20 ℃ 冰箱,避免反復(fù)凍融和融化后的血清在 2~8 °C 條件下長時間放置。


Q:血清是否需要做滅活處理?

滅活過程中,會導(dǎo)致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長因子等。所以只有在您的實(shí)驗(yàn)對血清有特殊要求時,才會考慮對血清進(jìn)行滅活處理。如您的實(shí)驗(yàn)對血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。最常見的情況是需要去除血清中的補(bǔ)體蛋白,因?yàn)檠a(bǔ)體在機(jī)體中參與細(xì)胞殺傷,巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化,肥大細(xì)胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過程,所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細(xì)胞和干細(xì)胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進(jìn)行滅活處理。


Q:如何進(jìn)行血清滅活處理?

先將血清融化和混勻,熱滅活時請將其置于 56 ℃ 水浴 30 分鐘。為盡量減少熱滅活對血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過大。最好準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),滅活時將裝有血清和水的容器同時放入 56 ℃ 水浴, 在裝水的容器中放置溫度計,加熱過程中不時輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,當(dāng)溫度計顯示達(dá)到 56 ℃ 左右,開始計時。56 ℃ 水浴后,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。

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