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葡萄糖攝取測定試劑盒安全、靈敏準確

2023-08-30 16:26 作者:認真搞科研的科研達人  | 我要投稿

葡萄糖攝取有多種方法和轉(zhuǎn)運蛋白,并且取決于細胞類型的代謝需求和葡萄糖的可用性。有十多種不同的促進擴散葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白,它們在沒有ATP水解的情況下將葡萄糖沿其濃度梯度運輸。在腎臟中,二級主動轉(zhuǎn)運用于根據(jù)其濃度梯度攝取葡萄糖,以確保尿液中排泄的葡萄糖很少。

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檢測精靈的基于熒光細胞的葡萄糖攝取測定使用2-脫氧葡萄糖(2-DG),這是一種廣泛使用的葡萄糖類似物,因為它可以被葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白吸收并被內(nèi)源性己糖激酶代謝為2-脫氧葡萄糖6-磷酸(2-DG6P)。2-DG6P在細胞內(nèi)積累,因為它不是磷酸葡萄糖異構酶的合適底物,磷酸葡萄糖異構酶是糖酵解的下一步。裂解細胞,加入過量的NADP和葡萄糖6-磷酸脫氫酶(G6PDH)以代謝2-DG6P并產(chǎn)生摩爾等量的NADPH。然后使用G6PDH循環(huán)反應測量NADPH以放大信號并產(chǎn)生可在Ex / Em = 530 / 585nm處測量的熒光信號,與2-DG6P的濃度成比例。測定全細胞中的葡萄糖攝取并評估配體或藥物對葡萄糖轉(zhuǎn)運的影響。

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艾美捷葡萄糖攝取測定試劑盒信息:

套件包括:?檢測緩沖液:10 mL G6P?試劑:1.5 mL?酶?A:120 uL?酶?B:120 uL G6PDH?酶:120 uL NADP:120 uL 2-DG?底物:1.2 mL?探頭:750 uL 2-DG6P?標準:120 uL NADP/NADPH?提取緩沖液:每個?12 mL

套件要求:?海衛(wèi)一?X-100 ;磷酸鹽緩沖鹽水;黑細胞培養(yǎng)96孔板;去離子水或蒸餾水;移液裝置;細胞培養(yǎng)箱;離心管;熒光酶標儀能夠在?lex/em = 530/585 nm?時讀取

檢測方法:?FL530/585納米

檢測限:?0.1?微米

樣品:?細胞培養(yǎng)

物種:?哺乳動物

協(xié)議長度:?約2小時

尺寸:?100?次測試

存儲:?將所有試劑儲存在-20°C。

保質(zhì)期:?6個月

葡萄糖攝取測定試劑盒主要特點:

安全。不使用放射性物質(zhì)。

靈敏準確。檢測限為?0.1 uM,線性度高達?5 uM 2-DG6P。

簡單方便??梢宰詣踊鳛榧毎衅咸烟寝D(zhuǎn)運的中等通量測定。


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