5637 人膀胱癌細胞 培養(yǎng)傳代信息介紹
細胞介紹
該細胞系是1974年從68歲的男性膀胱癌組織中分離，5637細胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。
基本信息
細胞來源：膀胱
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
生長特性：貼壁生長
安全等級：BSL1
包裝規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
推薦換液：2~3次/周
倍增時間：~24-36 hours
傳代比例：1:3~1:4
保藏機構：ATCC;HTB-9
培養(yǎng)保存
培養(yǎng)體系：RPMI 1640（TM175）+10%FBS（TS500）
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%；溫度：37℃
凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+40%FBS（TS500）
傳代步驟
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次；
加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化；
按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻；
收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。
凍存步驟
細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數；
4min 1000rpm 離心去掉上清。加入配制好的細胞凍存液（4°C預冷）重懸細胞，輕輕混勻，細胞密度不低于1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識；
將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞用途
僅供科研使用。
